تاثیر عصاره گیاه شوید کوهی بر بیان ژن پمپ افلاکس oqxa در سویه‌های بالینی مقاوم به آنتی‌بیوتیک کلبسیلا پنومونیه با استفاده از روش‌ real time pcr

مقدمه: کلبسیلا پنومونیه به عنوان یکی از مهم‌ترین عوامل ایجاد کننده عفونت‌های بیمارستانی بویژه عفونت‌ زخم‌ها پس از جراحی مطرح می‌باشد. یکی از مکانیسم‌های مقاومت این باکتری به آنتی‌بیوتیک‌ها مخصوصاً سیپروفلوکساسین، وجود پمپ‌های افلاکس می‌باشد. هدف: بررسی تاثیر عصاره گیاه شوید کوهی (grammosciadium platycarpum boiss. hausskn.) بر روی بیان ژن پمپ افلاکسoqxa در سویه‌های بالینی مقاوم به آنتی‌بیوتیک کلبسیلا پنومونیه می‌باشد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، نمونه‌های بالینی از بیمارستان‌های شهر تهران جمع‌آوری شد و ایزوله‌های کلبسیلا پنومونیه جداسازی شد و به دنبال آن سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین و حاوی ژن پمپ افلاکس oqxa با روش pcr شناسایی شد. در انتها، میزان بیان ژن پمپ افلاکس oqxa در سویه‌های تیمار شده با عصاره گیاه شوید کوهی با روش real time pcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: در این مطالعه، تعداد 50 ایزوله کلبسیلا پنومونیه جداسازی شد و نتایج حساسیت آنتی‌بیوتیکی نشان داد که 70 درصد (35 نمونه) مقاوم به سیپروفلوکساسین بودند و ژن oqxa در 43 درصد (15 نمونه) از سویه‌های کلبسیلا پنومونیه مقاوم مشاهده شد. نتایجreal time pcr نشان داد که بیان ژن oqxa در سویه‌های تیمار شده با عصاره کاهش بیان معنی‌داری داشتند. نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که عصاره گیاه شوید کوهی باعث مهار بیان پمپ افلاکس در سویه‌های کلبسیلا پنومونیه می‌شود و با مطالعات بیشتر می‌توان از عصاره این گیاه به عنوان کاندید دارو استفاده نمود.

The impact of Grammosciadium platycarpum Boiss. & Hausskn. extract on oqxA efflux pump gene expression in antibiotic resistant clinical isolates of Klebsiella pneumoniae using real time PCR

Background: Klebsiella pneumoniae is one of the most important causes of nosocomial infections, especially wound infection after surgery. One of the mechanisms of antibiotic resistance in K. pneumoniae strains, especially ciprofloxacin, is the presence of efflux pump. Objective: The aim of this study was to evaluate the antiefflux activity of Grammosciadium platycarpum Boiss. Hausskn. extract on the expression of oqxA efflux pump in K. pneumoniae strains which were resistant to antibiotics. Methods: In this experimental study, clinical specimens were collected from hospitals in Tehran and the K. pneumoniae strains were isolated. Subsequently, ciprofloxacinresistant strains containing the oqxA efflux gene were detected using PCR. Finally, the gene expression of oqxA efflux pump in the strains treated with G. platycarpum extract was investigated using Real Time PCR. Results: In this study, 50 K. pneumoniae strains were isolated from clinical specimens and the results of antibiotic susceptibility showed that 70% (35 strains) of isolates were resistant to ciprofloxacin and oqxA gene was observed in 43% (15 strains) of ciprofloxacin resistant K. pneumoniae strains. Moreover, Real Time PCR results showed that the expression of oqxA gene in the strains which are treated with extract, downregulated significantly. Conclusion: The results of this study showed that the G. platycarpum extract can inhibits the expression of the oqxA efflux pump in K. pneumoniae strains, and with further studies, the G. platycarpum extract can be used as a candidate for the drug design.