بررسی اثر سمیت سلولی عصاره هیدروالکلی گل‌های انار (punica granatum l.) و اسید اورسولیک خالص ‌شده از آن بر روی سلول‌های ملانوما b16f10

مقدمه: ملانوما خطرناک‌ترین نوع سرطان پوست است و بیشترین سرعت رشد را در میان انواع سرطان‌ها داراست. اسید اورسولیک یکی از تری‌ترپنوئیدهای پنتاسیکلیک شناخته ‌شده است که به ‌طور گسترده در گیاهان دارویی از جمله گل انار وجود دارد. هدف: مطالعه حاضر به بررسی اثر سایتوتوکسیک عصاره اتانولی گل‌های انار و همچنین اسید اورسولیک خالص‌شده از آن بر سلول‌های ملانوما موشی b16f10 می‌پردازد. روش بررسی: خالص‌سازی اسید اورسولیک از گل‌های انار، با استفاده از عصاره‌گیری با کمک اولتراسوند و به دنبال آن فلش کروماتوگرافی فاز نرمال انجام شد. ساختار شیمیایی اسید اورسولیک خالص‌شده به‌وسیله کروماتوگرافی گازی جفت شده با اسپکتروسکوپی جرمی (gc-ms)، طیف‌سنجی مادون‌قرمز (ir) و h-nmr تایید شد. سپس اثر عصاره اتانولی گل‌های انار و همچنین اسید اورسولیک خالص ‌شده از آن در مهار تکثیر سلول‌های ملانوما موشی b16f10 با استفاده از روش mtt انجام شد. نتایج: نتایج این مطالعه استخراج و خالص‌سازی موفق و پربازده اسید اورسولیک از گل‌های انار را توسط این روش فلش نشان داد. بعد از یک ‌بار فلش کروماتوگرافی، درصد خلوص اسید اورسولیک بیش از 97 درصد و مقدار محصول 0/1درصد پودر خشک گل انار بود. تیمار سلول‌های b16f10 با عصاره‌ اتانولی گل‌های انار و اسید اورسولیک خالص‌شده از آن، فعالیت ضد‌تکثیری معنی‌داری را بعد از 48 و 72 ساعت نشان داد. این فعالیت مهاری از ‌عصاره گل‌های انار به‌صورت وابسته به غلظت و زمان مشاهده شد. نتیجه‌گیری: نتایج این تحقیق حاکی از ارزشمند بودن عصاره‌ گل‌های انار و اسید اورسولیک خالص‌شده از آن در پیشگیری و درمان ملانوما می‌باشد.

Cytotoxic effect of hydro-alcoholic extract of pomegranate (Punica granatum L.) flowers and isolated ursolic acid on B16f10 melanoma cells

Background: Melanoma is the most serious form of skin cancer and it has the highest rate of growth among different types of cancers. Ursolic acid (UA), a natural pentacyclic triterpenoid, is a major bioactive compound in several traditional medicinal plants including pomegranate (Punica granatum L.) flower. UA has very important biological and pharmacological functions. Objective: In this study, cytotoxic effects of ethanol extract of pomegranate flowers and isolated UA against B16f10 mouse melanoma cells were investigated. Methods: The isolation of UA from pomegranate flowers was done by using ultrasoundassisted extraction followed by normalphase flash chromatography. The chemical structure of isolated UA was identified by GCMS, IR and 1HNMR spectra. The ethanol extract of pomegranate flowers and isolated UA were then tested for the cytotoxicity against B16f10 mouse melanoma cell lines. Cell viability was determined using MTT assay. Results: Ursolic acid was successfully isolated from pomegranate flowers by using normalphase flash chromatography. After one flash chromatography run, the purity of UA reached more than 97% with a total yield of 0.1 % of dried pomegranate flower powder. Treatment of B16f10 cells with ethanol extract of pomegranate flowers and isolated UA exhibited significant antiproliferative activity after incubation for 48 and 72 hours. It was observed for pomegranate flower extract in a concentration and time dependent manner. Conclusion: The results suggested that pomegranate flower extract and isolated UA can be encouraging compounds in the prevention and treatment of melanoma.