بررسی اثر هم‌افزایی بربرین و سیس‌پلاتین بر القای آپوپتوز در رده سلولی calu-6 و ارزیابی تغییرات به‌وجودآمده در سطح بیان ژن‌های bax, p53 ,caspase3, caspase9

سابقه و هدف: سرطان ریه شایع‌ترین علّت مرگ ناشی از سرطان در سراسر جهان است. بربرین یک آلکالوئید گیاهی و دارای خواص آنتی‌اکسیدانی، ضدسرطانی و ضدتوموری می‌باشد. سیس‌پلاتین یک القاکننده قوی آپوپتوز در اکثر انواع سلول‌های سرطانی می‌باشد. در مطالعه حاضر توانایی بربرین به‌تنهایی و در ترکیب با سیس‌پلاتین بر القای آپوپتوز در رده سلولی calu-6 (دودمان سرطان ریه انسانی) مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روش‌ها: در این پژوهش تجربی برای بررسی اثرات سیتوتوکسیک ترکیب توام بربرین با سیس‌پلاتین بر تکثیر سلول‌های calu-6 از آزمون mtt استفاده شد؛ جهت بررسی آپوپتوز در سلول‌های تحت‌تیمار از رنگ‌آمیزی dapi و آزمون annexin v-fitc استفاده شد؛ تغییرات در سطح بیان نسخه رونوشت ژن‌های bax, caspase 3,9, p53 با تکنیک real-time pcr ارزیابی شد. داده‌های کمّی حاصل توسط آزمون آماری واریانس یک‌طرفه anova در سطح معنی‌داری 0/05>p تحلیل گردید. نتایج: نتایج حاصل از آزمون mtt نشان داد که ترکیب بربرین با سیس‌پلاتین، تکثیر سلول‌های calu-6 را به‌صورت وابسته به غلظت و زمان، مهار می‌کند، مشاهدات مورفولوژیک حاصل از روش dapi و نتایج آزمون annexin v-fitc نشان‌دهنده افزایش سلول‌های آپوپتوتیک در گروه‌های تیماری بود. نتایج real-time pcr نشان‌دهنده افزایش بیان نسخه رونوشت ژن‌های bax, caspase 3,9, p53 در گروه‌های تیماری بود.نتیجه‌گیری: نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که کاربرد توام بربرین همراه با سیس‌پلاتین، تکثیر سلول‌های calu-6 را مهار می‌کند و باعث القای آپوپتوز در این سلول‌ها می‌شود.

investigating the synergistic effect of berberine and cisplatin on induction of apoptosis in calu-6 cell line and evaluation of changes in the expression level of bax, p53, caspase 3, caspase 9 genes

background: lung cancer is the most common cause of cancer death worldwide. berberine as a herbal alkaloid has antioxidant, anti-cancer and anti-tumor properties. cisplatin is a potent inducer of apoptosis in most types of cancer cells. in the present study, investigated the ability of berberine alone and in combination with cisplatin to induce apoptosis in the calu-6 cell line (human lung cancer cell line).materials and methods: in this experimental study, mtt assay was used to evaluate the cytotoxic effects of combination of berberine with cisplatin on calu-6 cell proliferation; dapi staining and annexin v-fitc assay were also used to evaluate apoptosis in treated cells; changes in the level of transcripts of bax, caspase 3,9, p53 genes were examined by real-time pcr. quantitative data were analyzed by one-way anova at a significant level of p<0.05.results: the mtt assay results showed that the combination of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of calu-6 cells in a concentration- and time-dependent manner. morphological observations obtained from dapi staining method and annexin v-fitc assay showed an increase in apoptotic cells in the treatment groups. the real-time pcr results showed an increase in the expression of transcripts of bax, caspase 3,9, p53 genes in the treatment groups.conclusion: the results of this research showed that the concomitant use of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of calu-6 cells and induces apoptosis in these cells.