اثر والپروئیک اسید بر بیان ژن‌های مسیر خارجی (dr4, dr5, fas, fas-l, trail) و مسیر داخلی آپوپتوز (bax, bak and apaf1, bcl-2, and bcl-xl)، میزان زنده بودن سلول و آپوپتوز سلولی در سرطان کبد رده سلولی plc/prf5

سابقه و هدف: استیلاسیون و دِاستیلاسیون هیستون، نقش مهمی در نسخه‌برداری و بیان ژن بازی می‌کنند. وضعیت استیلاسیون پروتئین‌های هیستونی و غیرهیستونی به‌وسیله آنزیم‌های هیستون استیل ترانس فراز (histone acetyltransferases, hats) و هیستون دِاستیلاز (histone deacetylases, hdacs) تعیین می‌شود. مهارکننده‌های آنزیم‌های هیستون دِاستیلاز، اثرات مولکولی و خارج سلولی مختلفی القا می‌کنند که منجر به ایفای نقش ضدسرطانی آن‌ها می‌شود. این تحقیق به منظور بررسی اثر داروی والپروئیک اسید بر بیان ژن‌های مسیر خارجی و مسیر داخلی آپوپتوز، میزان زنده بودن سلول و آپوپتوز در سرطان کبد رده سلولی plc/prf5 طراحی شد.مواد و روش‌ها: سلول‌های سرطانی کبد رده plc/prf5 کشت داده شدند و پس از این‌که هم‌پوشانی سلول‌ها به حدود 80 درصد رسید، سلول‌ها با تریپسین جمع‌آوری گریدند و پس از شستشو، در پلیت با غلظت 105 × 3 کشت داده شدند. پس از 24 ساعت، محیط کشت با محیط حاوی داروی والپروئیک اسید تیمار شدند (گروه کنترل فقط dmso دریافت کردند). 24، 48 و 72 ساعت پس از تیمارکردن، به منظور تعیین میزان زنده بودن سلول، سلول‌های آپوپتوتیک و بیان ژن، به‌ترتیب تکنیک‌های mtt، فلوسیتومتری و realtime انجام شد. نتایج: والپروئیک اسید به‌طور معنی‌داری باعث مهار رشد سلولی، القای آپوپتوز، کاهش بیان ژن‌های bcl2, and bclxl و افزایش بیان ژن‌های dr4, dr5, fas, fasl, trail, bax, bak and apaf1 گردید. نتیجه‌گیری: به‌نظر می‌رسد والپروئیک اسید نقش آپوپتوزی خود را از طریق مسیرهای آپوپتوزی داخلی و خارجی در سرطان کبد ایفا می‌کند.

Effect of valproic acid on extrinsic (DR4, DR5, FAS, FAS-L, TRAIL) and intrinsic (BAX, BAK and APAF1, Bcl-2, and Bcl-xL) apoptotic pathways, cell viability and apoptosis in hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 cell line

Background: Histone acetylation and deacetylation play an important role in transcription and gene expression. The acetylation status of histones and nonhistone proteins is determined by histone acetyltransferases (HATs) and histone deacetylases (HDACs). Histone deacetylase inhibitors (HDACIs) induce various molecular and extracellular effects, leading to potent anticancer activities. The current study was designed to investigate the effect of valproic acid) VPA( on extrinsic and intrinsic apoptotic pathways, cell viability, and apoptosis in hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 cell line.Materials and Methods: The hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 was cultured. When cells approximately became 80% confluent, 3 ×105 cells were seeded into 96 and 24‑well plates. After 24 h, the medium was replaced with the medium contains VPA (except control groups which were treated with DMSO). After 24, 48, and 72 h, to determine cell viability, cell apoptosis and gene expression, MTT assay, flow cytometry and Realtime quantitative RTPCR (qRTPCR) were done respectively.Results: VPA inhibited cell viability, induced apoptosis, decreased Bcl2, and BclxL and increased DR4, DR5, FAS, FASL, TRAIL, BAX, BAK and APAF1 significantly.Conclusion: It seems that VPA can play its role through intrinsic and extrinsic apoptotic pathways in hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 cell line.