بررسی خصوصیات بیوفیزیکی و الکتروفارماکولوژیکی تک کانال mitoKATP در غشا داخلی میتوکندری مغز موش صحرایی

مقدمه: کانالهای پتاسیمی حساس به atp مختلفی در غشا داخلی میتوکندری شناسایی شده‌اند. این کانالها در فرآیندهای سلولی همچون حفاظت سلولی نقش دارند. در‌ اینجا ما خواص بیوفیزیکی و الکتروفارماکولوژی یک کانال katp را در غشا داخلی میتوکندری مغز گزارش نموده‌ایم. روش‌ها: مغز موش بزرگ آزمایشگاهی بالغ بعد از برداشتن، هموژنیزه و محلول آن در طی مراحل mse-دیژیتونین، آب، و بیکربنات سدیم سانتریفیوژ و وزیکول‌های غشا داخلی میتوکندری جدا گردید. فسفاتیدیل کولین از زرده تخم مرغ استخراج گردید. غشا در منفذی به قطر µm 150 تشکیل شد. سیگنالهای ثبت تک کانال khz 1 فیلتر و با سرعت نمونه برداری khz 10 ذخیره گردیدند. اطلاعات با نرم افزار pclamp 10 آنالیز گردیدند.یافته‌ها: ثبت‌ تک‌کانال، کانالی با کنداکتانس 143±ps7 و وابسته به ولتاژ را در محیط غلظتی 200mm kcl cis/50 mm kcl trans نشان داد. توزیع‌های زمانی وضعیت بسته، یک جز توانی را برای ولتاژهای مثبت و دو جز توانی را برای ولتاژهای منفی نشان داد. توزیع‌های زمانی وضعیت باز بر دو جز توانی باز بودن منطبق بود. مهار کانال توسط atp و از مشخصه‌های کانال، بعنوان کانال katp بود. 4-ap و tea فعالیت کانال را مهار نموده ولی فعالیت کانال تحت تاثیر ایبریوتوکسین و کاریبوتوکسین بعنوان مهارکننده‌های کانال bk تغییر پیدا نکرد و 5-هیدروکسی‌دکانوییک اسید بعنوان بازدارنده کانال پتاسیمی حساس به atp کانال را تحت تاثیر قرار نداد. وسترن‌بلات و استفاده از آنتی‌بادی‌هایی بر ضد زیرواحدهای kir6.1 و sur2b، پروتیینهایی با وزن مولکولی ~55-64 kda و ~120 kda را مشخص نمود.نتیجه گیری: نتایج ما حضور کانال katp را در میتوکندری مغز نشان می‌دهد. این کانال احتمالاً نقش مهمی در همیوستازی میتوکندری مغز دارد.