استفاده از روش real-time pcr به منظور شناسایی بیماری‌‌های ویروسی اخطار کردنی (ipn، vhs و ihn) در مولدین قزل‌آلای رنگین کمان نسل پایه ماهیان عاری از عوامل بیماریزای خاص (spf)

هدف از اجرای این پژوهش، شناسایی عوامل مختلف بیماری زا ویروسی ماهی قزل آلای رنگین کمان با استفاده از روش real-time pcr به منظور تشخیص سریع و دقیق بیماری های ویروسی شایع شامل بیماری نکروز عفونی بافت خونساز (ihn)، بیماری سپتی سمی هموراژیک ویروسی (vhs) و بیماری نکروز عفونی پانکراتیک (ipn) در جمعیت مولدین نسل پایه نگهداری شده در طرح کلان ملی تولید ماهیان عاری از بیماری های خاص (spf) بوده است. بدین منظور از مولدین مزارع منتخب مورد تایید سازمان دامپزشکی کشور در استان‌‌های مازندران، کهگیلویه و بویراحمد و آذربایجان غربی نمونه‌‌برداری شد. نمونه‌‌برداری از ماهیان در رده‌‌های سنی متفاوت و از اندام‌‌های مختلف صورت پذیرفت و نمونه‌‌ها بلافاصله در ازت مایع منجمد شدند. استخراج rna و آزمایشات real-time pcr با استفاده از پرایمرهای مربوط به ویروس‌‌های مورد نظر انجام شد. نتایج حاصل از آزمایش ماهیان سالم و مشکوک به بیماری های ویروسی به روش real-time pcr، وجود ویروس های بیماری زای vhs و ihn را در تعدادی از مزارع منتخب نشان داد در حالیکه ویروس بیماری زای ipn در نمونه‌‌ها شناسایی نشد. بر اساس نتایج حاصل از این بررسی بنظر می‌‌رسد که روش real-time pcr می‌تواند به عنوان روش تشخیصی سریع در آزمایش های غربال گری بیماری های ویروسی قزل آلای رنگین کمان و نیز روش مکمل تشخیص ویروس های بیماری زا در ادامه آزمایش های متداول کشت بافت مورد استفاده قرار گیرد.

Using Real-Time PCR to Detect Notifiable Viral Diseases (IPN, VHS and IHN) in Specific Pathogen Free (SPF) Rainbow Trout Broodstock Generations

The aim of this study was to identify different virulence pathogens using Real-Time PCR method for rapid and accurate detection of common viral diseases including Infectious Hematopoietic Necrosis (IHN), Viral Hemorrhagic Septicemia (VHS) and Infectious Pancreatic Necrosis disease (IPN) in rainbow trout broodstock have been the main generation of reproductive populations maintained in the national plan for production the Specific Pathogen Free (SPF) fish. For this purpose, sampling was carried out on selected farms approved by the National Veterinary Organization in the provinces of Mazandaran, Kohgiluyeh and Boyerahmad and West Azerbaijan. Sampling of fish was done in different age groups and organs and was immediately frozen in liquid nitrogen. RNA extraction and Real-Time PCR experiments were performed using primers for the diseases. The results obtained using Real-Time PCR testing of healthy and suspected viral fishes showed the presence of VHS and IHN viruses in a number of selected farms, while the pathogenic virus IPN not detected. Based on the results of this study, it seems that Real-Time PCR can be used as a rapid diagnostic method in screening tests for rainbow trout viruses and as a complementary method for virus detection in routine tissue culture experiments.