بررسی ﻣﯿﺰان شیوع آلودگی شیر و فرآورده‌های لبنی سنتی به باکتری ﺑﺮوﺳﻼ ملی تنسیس به روش pcr، شهرستان ممسنی، استان فارس، جنوب ایران

زمینه و هدف: ﺳﻼﻣﺖ ﺷﯿﺮ و ﻓﺮآورده‌ﻫﺎی آن ﺑﻪ دﻟﯿﻞ ارزش ﺑﺎﻻی غذایی آن از اﻫﻤﯿﺖ ﺑﺴﺰایی ﺑﺮﺧﻮردار می‌ﺑﺎﺷﺪ. این ﻣﯿﺎن وﻋﺪه ﻣﻐﺬی، به وسیله ﻋﻮاﻣﻞ میکروبی آﻟﻮده می‌ﺷﻮد. بروسلوز یکی از مهم‌ترین بیماری‌های زئونوز محسوب شده و در کشورهای خاورمیانه به صورت اندومیک شایع بوده و در جمعیت انسانی و دامی نقاط مختلف کشورمان نیز گزارش شده است. بروسلوز، یک بیماری عفونی باکتریایی است که به وسیله میکروارگانیسمی از جنس بروسلا ایجاد شده و از ﻃﺮیق ﺷﯿﺮ و فرآورده های لبنی غیرپاستوریزه اﻧﺘﻘﺎل می‌یاﺑﺪ. هدف از این مطالعه بررسی ﻣﯿﺰان شیوع آلودگی شیر و فرآورده‌های لبنی سنتی به باکتری ﺑﺮوﺳﻼ ملی تنسیس به روش pcr، شهرستان ممسنی، استان فارس، جنوب ایران می باشد.روش بررسی: در این مطالعه توصیفی- مقطعی که در سال 1400 انجام شد، 200 نمونه از فرآورده‌های لبنی سنتی شامل 50 نمونه شیر خام، 50 نمونه ماست، 50 نمونه پنیر و 50 نمونه کره از دامپروری‌های مناطق روستایی و مغازه‌های درون شهری شهرستان ممسنی جمع آوری و ﺑﻪ آزمایشگاه میکروب‌شناسی ﻣﻨﺘﻘﻞ گردید. ﺟﻬﺖ ﺗﺸﺨﯿﺺ گونه احتمالی باکتری ﺑﺮوﺳﻼی موجود در نمونه‌ها، از ﻣﺤﯿﻂ کشت ﺣﺎوی ساپلیمنت ﺟﻬﺖ ﺟﻠﻮگیری از رﺷﺪ سایر پاتوژن‌ها اﺳﺘﻔﺎده گردید. dna نمونه‌ها به وسیله کیت dnp استخراج گردید. جهت بهینه‌سازی تست pcr، نمونهdna از سوش استاندارد باکتری به روش جوشاندن و (cat:dn 811530)dng  استخراج شد. در هر واکنش، dna الگو، پرایمرها(bru و low bru up)، کلرید منیزیوم، dnt و آنزیم taq dna پلیمراز مطابق دستورالعمل استفاده شد. واکنش مرحله دوم با همان مقادیر بهینه گردید. در مرحله دوم به جای dna الگو، از محصول راند اول استفاده شد. پرایمرهای مرحله دوم شامل پرایمرهای bru up, bru in می‌باشد. داده‌های جمع‌آوری شده با استفاده از آزمون آماری کای اسکوئر تجزیه و تحلیل شدند.یافته‌ها: نتایج این مطالعه، به ترتیب 1.86، 2.8، 0.3 درصد و صفر درصد از نمونه‌های شیر خام، پنیر، ماست و کره آلوده به باکتری بروسلا ملی تنسیس تشخیص داده شد. تست pcr بهینه شده از اختصاصیت بسیار بالایی برخوردار بود، به طوری که به جز dna بروسلا با هیچ کدام از dnaهای مورد مطالعه واکنشی صورت نگرفت. نتیجه‌گیری: اگر چه تماس با دام و فرآورده‌های آلوده به باکتری بروسلا به عنوان مهم‌ترین عوامل ابتلا به بروسلوز شناخته شده‌اند، ولی شرایط اقلیمی و نوع دامداری و رفتار غذایی مردم در شیوه استفاده از فرآورده‌های دامی و نیز گونه‌ پاتوژن در هر ناحیه جغرافیایی عواملی هستند که الگوی بروز بیماری را در جوامع مختلف نشان می‌دهد. ﻧﺘﺎیج ﺑه ﺪﺳﺖ آﻣﺪه نشان می دهد که با وجود اقدامات ﺻﻮرت گرﻓﺘﻪ ﺟﻬﺖ پیشگیری از ﺑﯿﻤﺎری ﺑﺮوﺳﻠﻮز، ﻫﻨﻮز اﺣﺘﻤﺎل آﻟﻮدگی فرآورده‌های لبنی ﺑﻪ باکتری ﺑﺮوﺳﻼ وﺟﻮد دارد. 

investigating the rate of contamination of milk and traditional dairy products with brucella bacteria by pcr method, mamasani district, fars province, south of iran

background & aim: the health of milk and its products is of great importance due to its high nutritional value. this nutrient medium is contaminated by microbial agents. brucellosis is considered one of the most important zoonotic diseases and is endemic in the middle east countries and has been reported in human and livestock populations in different parts of iran. brucellosis is an infectious bacterial disease caused by a microorganism of the genus brucella and transmitted through unpasteurized milk and dairy products. the aim of the present study was to investigate the prevalence of contamination of milk and traditional dairy products with brucella bacteria by pcr method, mamasani district, fars province, south of iran.methods: in the present cross-sectional descriptive study conducted in 2021, 200 samples of traditional dairy products including 50 samples of raw milk, 50 samples of yogurt, 50 samples of cheese and 50 samples of butter from livestock farms in rural areas and inner-city shops of mamasani district were collected and transferred to the microbiology laboratory. in order to identify the possible type of brucella bacteria in the samples, the culture medium containing the supplement was used to prevent the growth of other pathogens. dna of samples was extracted by dnp kit. in order to optimize the pcr test, the dna sample was extracted from the standard strain of bacteria by boiling method and (cat: dn 811530) dng. in each reaction, template dna, primers (bru and low bru up), magnesium chloride, dnt and taq dna polymerase enzyme were used according to the instructions. the second step reaction was optimized with the same values. in the second step, instead of template dna, the product of the first round was used. second stage primers include bru up, bru in primers. the collected data were analyzed using spss software and chi-square statistical test.results: the results of the present study indicated that 1.86%, 2.8%, 0.3% and 0% of raw milk, cheese, yogurt and butter samples were infected with brucella melitensis bacteria, respectively. the optimized pcr test had a very high specificity, as a result it did not react with any of the studied dnas except brucella dna.conclusion: although contact with animals and products infected with brucella bacteria are known as the most important factors of brucellosis, but then again the climatic conditions and the type of animal farming and the eating behavior of the people in the way of using animal products as well as the pathogen species in each geographical area are the factors that determine the pattern of the disease. it displays the incidence of disease in different societies. the obtained results indicated that despite the measures taken to prevent brucellosis disease, there was still a possibility of contamination of dairy products with brucella bacteria.