بررسی اثر عصاره میوه گیاه citrullus colocynthis بر بیان ژن‌های casp3 و casp8 در رده سلولی سرطان گلیوبلاستومای انسانی (u87)

زمینه و هدف: استفاده از ترکیبات استخراج‌شده از گیاهان طبیعی به دلیل کمتر بودن اثرات جانبی می‌تواند جایگزین مناسبی برای داروهای شیمیایی در درمان بیماری‌های کشنده‌ای مثل سرطان باشد. در این تحقیق اثر ضدسرطانی عصاره میوه گیاه هندوانه ابوجهل بر سلول‌های سرطانی گلیوبلاستوما انسانی رده سلولی u87 بررسی شده است. لذا هدف از این مطالعه تعیین و بررسی اثر عصاره میوه گیاه citrullus colocynthis بر بیان ژن‌های کاسپاز 3 و کاسپاز 8 در رده‌ی سلولی سرطان گلیوبلاستومای انسانی بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی که در سال1398 در دانشکده داروسازی و علوم دارویی دانشگاه آزاد اسلامی انجام شد، عصاره میوه گیاه به روش استخراج با اتانول 70 درصد تهیه شد و برای ارزیابی اثر سمیت 104 سلول از سلول‌های u87 با غلظت‌های مختلفی از این عصاره تیمار شد. این سلول‌ها به صورت گروه‌های مستقل تحت تیمار با غلظت‌های مشخص عصاره در زمان‌های 24، 48 و 72 ساعت قرار گرفتند و به وسیله روش‌ mtt ارزیابی شدند. مقدار غلظت ic50 مشخص شده در زمان 24 ساعت، به عنوان غلظت مبنا برای تیمار سلول‌ها جهت ارزیابی میزان بیان ژن به وسیله آزمون real-time pcr استفاده شد. داده‌های جمع‌آوری شده با استفاده از آزمون‌های آماری کولموگورف اسمیرنوف، آنالیز واریانس یک طرفه و توکی تجزیه و تحلیل شدند. یافته‌ها: نتایج به ‌دست‌ آمده از آزمون mtt نشان داد که رشد سلول‌های تیمار شده در غلظت‌های بالاتر از غلظت 1000 میکروگرم در میلی لیتر از عصاره میوه کاملاً مهارشده است و مقدار ic50 محاسبه‌شده برای زمان‌های 24، 48 و 72 ساعت تیمار به ترتیب برابر 1337.42 (p>0.0001)، 892.99 (0.0012=p) و 387.49 (p>0.0001) میکروگرم بر میلی‌لیتر از عصاره به دست آمد. استفاده از مقدار ic50 عصاره میوه گیاه هندوانه ابوجهل به مدت 24 ساعت، باعث افزایش بیان ژن مربوط به کاسپاز 3 و 8 به ترتیب برابر 3.052(0.0013=p) و 2.099(0.0265=p) برابر می‌شود. نتیجه‌گیری: این نتایج نشان داد که اثر سمیت سلولی عصاره میوه گیاه هندوانه ابوجهل بر رده سلولیu87 وابسته به غلظت و زمان است و مکانیسم اثر مهارکنندگی این عصاره می‌تواند بر اساس افزایش بیان ژن کاسپاز 3 و 8 برای القای مرگ سلولی از مسیر خارجی باشد. از عصاره میوه این گیاه می‌توان برای مهار رشد سلول‌های سرطانی گلیوبلاستوما و احتمالاً از بین بردن تومور مغزی استفاده کرد.

The Effect of Citrullus colocynthis on the Induction of Casp3 and Casp8 Gene Expression on Human Glioblastoma U87 Cell Line

Background aim: The use of compounds extracted from natural plants due to less side effects can be a good alternative to chemical drugs in the treatment of deadly diseases such as cancer. In this study, the anticancer effect of Abu Jahl watermelon fruit extract on human glioblastoma cancer cells of U87 cell line was investigated. Therefore, the aim of this study was to determine and evaluate the effect of Citrullus colocynthis fruit extract on the expression of caspase 3 and caspase 8 genes in human glioblastoma cancer cell line.Using in vitro MTT assay and Realtime PCR, the cytotoxicity and cell inhibition mechanism of using Citrullus colocynthis on human glioblastoma U87 cell line was investigated. Methods: In this experimental study conducted in 2019 in the Faculty of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences of Islamic Azad University, the fruit extract of the plant was prepared by extraction with 70% ethanol and to evaluate the toxicity of 104 cells of U87 cells were treated with different concentrations of this extract. These cells were treated as independent groups with specific concentrations of the extract at 24, 48 and 72 hours and were evaluated by MTT method. The determined IC50 concentration at 24 hours was used as the basal concentration for cell treatment to evaluate the amount of gene expression by Real-Time PCR. The collected data were analyzed using KolmogorfSmirnov statistical tests, oneway analysis of variance and Tukey. Results: The results obtained from MTT test showed that the growth of treated cells at concentrations higher than 1000 mu;g / ml of fruit extract was completely inhibited and the IC50 value calculated for 24, 48 and 72 hours of treatment was 1337.42, respectively. (P> 0.0001), 892.99 (p = 0.0012) and 387.49 (p> 0.0001) mu;g / ml of extract. Using IC50 value of Abu Jahl watermelon fruit extract for 24 hours increases the expression of caspase 3 and 8 gene by 3.052 (p = 0.0013) and 2.099 (p = 0.065), respectively. . Conclusion: The data revealed from this work determined that Citrullus colocynthis extract has concentration and time dependent toxicity effects on U87 cell line and the inhibition mechanism of this plant may be due to the induced Casp3 and Casp8 gene expression which leads to extrinsic apoptosis pathway. So, Citrullus colocynthis extract can be used to inhibit glioblastoma cells growth and may treat brain tumor.