تاثیر آپوپتوتیک عصاره گیاه سنبله‌ای کرکدار(stachys pilifera benth) روی سلول‌های سرطان کلورکتال رده ht-29

زمینه و هدف: در طب سنتی از گیاه سنبله ای کرکدار برای درمان انواع بیماری ها استفاده می شود. علی رغم برخی گزارش ها در مورد اثرات ضد توموری برخی از گونه های این جنس، فعالیت ضد سرطان سنبله ای کرکدار هنوز گزارش نشده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر آپوپتوزی عصاره سنبله ای کرکدار(stachys pilifera benth) و فرکشن آلکالوئیدی و ترپنوئیدی آن در سلول های سرطانی کولورکتال ht29 می باشد. روش بررسی: در این مطالعه تجربی سلول های ht29 کشت شد و سپس سلول ها با غلظت های مختلف عصاره متانولی سنبله ای کرکدار، فرکشن های آلکالوئیدی و ترپنوئیدی و سیس پلاتین به مدت 24 ساعت انکوبه شدند. بقای سلول های سرطانی با استفاده از آزمون(mtt) اندازه گیری شد. اثرات عصاره و تست های انجام شده بر روی مکانیزم های مرگ و میر سلولی مانند قطعه قطعه شدنdna و آپوپتوز به وسیله دستگاه فلوسیتومتری انجام شد. سیس پلاتین به عنوان کنترل مثبت در این مطالعه مورد استفاده قرار گرفت. داده های جمع آوری شده با استفاده از آزمون های آماری آنالیز واریانس یک طرفه و تست تعقیبی توکی تجزیه و تحلیل شدند. یافته ها: نتایج ic50 عصاره متانولی، فرکشن های آلکالوئیدی، ترپنوئیدی و سیس پلاتین بر روی سلول ht29 بعد از 24 ساعت به ترتیب برابر 612.8، 46.4، 46.8 و 4.06 میکروگرم بر میلی لیتر بود. نتایج نشان داد که مهار تکثیر سلولی به صورت وابسته به دوز می باشد. عصاره متانولی سنبله ای کرکدار و سیس پلاتین باعث قطعه قطعه شدن dna شدند. نتایج تست آپوپتوز نشان داد که بیشترین درصد افزایش آپوپتوز در تیمار با سیس پلاتین( 30.8 درصد) و عصاره متانولی(23.2درصد) نسبت به گروه کنترل(تیمار نشده) بود(p<0/05).نتیجه گیری: عصاره هیدروالکلی سنبله ای کرکدار و فراکشن الکالوئیدی به صورت وابسته به دوز تکثیر سلول های سرطانی کلورکتال ht29 را متوقف و سلول ها را وارد فاز آپوپتوتیک می کند. بنابراین گیاه کاندیدای مناسبی برای جلوگیری از تکثیر سلوا های سرطانی کلورکتال می تواند باشد.

Apoptotic Effect of the Stachys pilifera Bent Plant Extracts on Colorectal Cancer Cell Line (HT- 29)

Background aim: Stachys pilifera Benth (Lamiaceae) is used in traditional medicine to treat a variety of diseases. Despite some reports on the antitumor effects of some species of this genus, anticancer activity of Stachys pilifera has not been yet reported. In the present study, the researchers examined the cytotoxic effect and cell death mechanisms of methanolic extract of Stachys pilifera and its alkaloid and terpenoid fractions on the HT29 colorectal cell line. Methods: In the present study, HT29 cells were cultivated and afterwards incubated in the methanolic extract of Stachys pilifera and its fractions at various concentrations for 24 hours. Cell viability was measured by 3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The effects of the extract and the tests performed on cell death mechanisms such as fragmentation of DNA and apoptosis were performed by flow cytometry. Cisplatin was used as the positive control. The collected data was analyzed by ANOVA and Tukey test. Results: The results of IC50 of methanolic extract, alkaloid, tropenoid, and cisplatin on HT29 cells after 24 hours were 612.8, 46.4, 46.8 and 4.06 mu;g / ml, respectively. The results indicated that the inhibition of cell proliferation was dosedependent. The methanolic extracts of Stachys and cisplatin resulted in DNA fragmentation. The results of apoptosis test revealed that the highest percentage of apoptosis was observed in cisplatin (30.8%) and methanolic extracts (23.2%) than the control (untreated) group (P <0.05). Conclusion: These findings provide a basis for the therapeutic potential of S. pilfera in the treatment of colon cancer.