بررسی کمّی تغییرات بیان ژنهای cxcl10 و cxcl11 در بیماران مبتلا به بیماری سلیاک با استفاده از پرایمرهای اختصاصی

زمینه: بیماری سلیاک یک اختلال سیستم ایمنی وابسته به لنفوسیت های t است. مطالعات اخیر نقش کموکاین های cxcl10 و cxcl11 را نشان می دهد که عامل ورود سلول های ایمنی به بافت های التهابی و فراخوانی لنفوسیت ها به محل التهاب در بیماران مبتلا به سلیاک است. لذا هدف از این مطالعه طراحی پرایمرهای اختصاصی برای بررسی ژن های cxcl10 و cxcl11 با تکنیک pcr در بیماران مبتلا به بیماری سلیاک و بررسی کمی بیان این دو ژن در خون این بیماران در مقایسه با افراد سالم کنترل است.روش کار: در این مطالعه از 10 بیمار مبتلا به سلیاک که بیماری آنها توسط آزمایشات پاتولوژی و نظر متخصص گوارش تایید شده بود و همچنین از 10 فرد سالم به عنوان گروه کنترل نمونه خون اخذ گردید. پس از استخراج rna و سنتز cdna، برای نواحی ثابت ژن های cxcl10و cxcl11 پرایمرهای اختصاصی exonexon junction طراحی و pcr انجام گردید و بررسی بیان این دو ژن با تکنیک realtime pcr صورت گرفت.یافته ها: با توجه به نتایج به دست آمده همه پرایمرهای طراحی شده دارای قابلیت بالایی از نظر تکثیر قطعات مورد نظر می باشند و همچنین افزایش بیان معنادار در بیان دو کموکاین cxcl10 و cxcl11 در بیماران مبتلا به سلیاک در مقایسه با افراد کنترل مشاهده شد (0.05 >p). نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که تغییر در بیان ژن های cxcl10 و cxcl11 در بیماران مبتلا به سلیاک نشان دهنده نقش سیستم ایمنی ذاتی در پاتوژنز بیماری سلیاک است.

Evaluation of CXCL10 and CXCL11 Genes in Patients with Celiac Disease by Specific Primer Paris

Background: Celiac Disease (CD) is a T cellmediated disorder. Recent studies suggest the role of chemokines CXCL10 and CXCL11 to promote the arrival of cells into inflamed tissues and in lymphocytic recruitment in active CD. The aim of this study was to investigate the new specific primer pairs for analysis of human CXCL10 and CXCL11 genes in blood samples of CD patients by Polymerase Chain Reaction (PCR) technique and to examine the quantitative expression of these genes in the blood of celiac patients compared with healthy controls.Methods: Blood samples were collected from 10 CD patients diagnosed according to the Iranian Society for Pediatric Gastroenterology and Marsh criteria and 10 as a control group after extraction of RNA from patients and cDNA was synthesized. By bioinformatics analysis, the specific regions of the CXCL10 and CXCL11 genes were designed and exonexon junction specific primers and PCR was performed. Later gene expression analysis was performed with Realtime PCR.Results: According to the results, all designed primers are highly capable of replicating the desired components. Also, there was a significant increase in expression of two chemokines CXCL10 and CXCL11 genes in the celiac patients compared to control groups (P<0.05).Conclusion: Our results from this study showed that changes in the expression of CXCL10 and CXCL11 genes in celiac patients indicate the role of the inherent immune system in the pathogenesis of CD.