مهار بیان ژن نوکلیوستمین به واسطه siRNA باعث مهار رشد، توقف چرخه سلولی و القای آپوپتوز در رده سلولی K562 لوسمی انسانی می‎شود

چکیده زمینه و هدف: نوکلیوستمین نقش عمده‎ای در کنترل رشد و خودنوزایی سلول‎های بنیادی و سرطانی ایفا می‎کند. بنابراین مهار بیان نوکلیوستمین می‎تواند به عنوان عامل بالقوه در درمان سرطان محسوب شود. در مطالعه حاضر، اثرات سرکوب بیان ژن نوکلیوستمین در رده سلولی k562 مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روش‎ها: در این مطالعه تجربی، پس از تیمار سلول‎های k562 با sirna اختصاصی نوکلیوستمین، تغییر در الگوی بیان نوکلیوستمین با واکنش رونویسی معکوس نیمه کمی بررسی گردید. آزمون دفع رنگ تریپان بلو و آزمون جذب نمک تترازولیوم و میکروسکوپ فلورسنت به ترتیب به منظور بررسی مهار رشد و مرگ سلولی سلول‎های k562 به کار گرفته شد. از فلوسایتومتری برای بررسی اثرات مهار ژن نوکلیوستمین بر چرخه سلولی استفاده گردید.یافته‎ها: نتایج نشان داد که ژن نوکلیوستمین بیان بالایی در سلول‎های k562 دارد. تیمار سلول‎های k562 باsirna اختصاصی نوکلیوستمین در غلظت 200 نانومولار پس از 48 ساعت، سطح mrna نوکلیوستمین را در مقایسه با سلول‎های کنترل به میزان 55 درصد مهار کرد. 48 ساعت پس از ترانسفکشن، رشد سلول‎ها به میزان 7/33 درصد کاهش یافت. هم‎چنین مهار بیان ژن نوکلیوستمین منجر به مهار چرخه سلولی در مرحله g1 شد. نتایج حاصل از میکروسکوپ فلوروسنت نشان داد که آپوپتوز، 48 ساعت پس از خاموشی بیان ژن نوکلیوستمین رخ می‎دهد.نتیجه گیری: با توجه به اثرات قوی مهار رشدی و آپوپتوزی sirna نوکلیوستمین در سلول‎هایk562 لوسمی میلویید انسانی، خاموشی بیان این ژن می‎تواند به عنوان یک هدف بالقوه در مهار سلول‎های k562، به عنوان مدل سلول بنیادی لوسمی میلوییدی مزمن باشد.واژگان کلیدی: آپوپتوز، لوسمی میلوییدی مزمن، نوکلیوستمین، sirna