تولید پروتیین نوترکیبCagA هلیکوباکترپیلوری

چکیدهزمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری باسیلی‎گرم منفی است که موجب بیماری‎های معده و دیودنوم در انسان می‎شود. از مهم‎ترین ژن‎های مرتبط با بیماری‎زایی این باکتری ژن caga می‎باشد که موجب کلونیزاسیون بیشتر آن در سلول‎های اپی تلیال معده و ایجاد التهاب و زخم‎های گوارشی می‎گردد. هدف از این مطالعه تولید پروتیین نوترکیب حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک caga در باکتری e. coli می باشد.مواد و روش‎ها: در این مطالعه تجربی، قطعه حاوی ناحیه آنتی ژنیک ژن caga به طول 1245 جفت باز براساس برنامه‎های بیوانفورماتیکی به دست آمد. سپس با روش pcr تکثیر، با آنزیم‎های محدود کننده bamhi و xhoi برش و در پلاسمید pet32a کلون و در e. coli bl21 (de3) plyss با القا توسط iptgبیان شد. از کیت ni-nta جهت تخلیص پروتیین بیان شده استفاده شد و آنتی ژنیسیته آن به روش لکه‎گذاری وسترن بررسی گردید. یافته‎ها: نتایج حاکی از کلونینگ و بیان موفقیت‎آمیز ژن هدف بود. در وسترن بلاتینگ پروتیین تولید شده با سرم‎های آلوده انسان و موش واکنش نشان داد. نتیجه‎گیری: نتایج نشان داد که پروتیین نوترکیب caga (65 کیلو دالتون) آنتی ژنیسیته خود را حفظ می‎کند. بنابراین می‎تواند برای تشخیص سرولوژیک بیماری‎های هلیکوباکتر پیلوری و تولید واکسن مورد استفاده قرار گیرد.واژگان کلیدی: کلونینگ، پروتیین caga، هلیکوباکتر پیلوری، پروتیین نوترکیب