|
|
|
|
ساخت باکیلوویروس نوترکیب کد کننده توام پروتیین‌های هماگلوتینین، نورآمینیداز و ماتریکس ویروس آنفلوانزای H1n1 خوکی و بیان آن در سلول‌های حشرات
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
بهزادیان فریدا ,گودرزی زهرا ,صابر فر اسماعیل
|
|
منبع
|
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك - 1391 - دوره : 15 - شماره : 8 - صفحه:16 -25
|
|
|
|
|
چکیده
|
چکیدهزمینه و هدف:تغییرات ژنتیکی ویروس آنفلونزا، هر ساله باعث ایجاد اپیدمی‌های جدید در سراسر دنیا می‌شود. ساخت یک واکسن جدید به منظور پیش‌گیری از ویروس آنفلونزا در چند سال اخیر هدف اصلی پژوهشگران بوده است. هدف ما از این پژوهش،ساختن باکیلوویروس نوترکیبی است که بتواند دو گلیکوپروتیین سطحی آنتی ژنیک هماگلوتینین و نورآمینیداز، به همراه پروتیین ماتریکس ویروس آنفلوانزاینوع a را به طور مستقل بیان نماید. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، ابتدا کاست سه گانه‌ای که بیان هم‌زمان و مستقل سه ژن هماگلوتینی، نورآمینداز و پروتیین ماتریکس را تامین نماید، طراحی و سنتز شد. این کاست سپس در پلاسمید دهندهpfastbac1 کلون شد تا به پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 دست بیابیم. کلون مذکور در میزبان e.coli dh10bac با انجام ترانسپوزیشن همسان، بکمید نوترکیب را ساخت. این سازه پس از تایید با pcr، برای تکوین باکیلوویروس نوترکیب در سلول‌های حشرات sf9 تراریخت شد. یافته‌ها: نتایج هضم آنزیمی، کلونینگ صحیح پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 را تایید نمود. طول صحیح نواحی تکثیر یافته هدف بر روی بکمید نوترکیب،دلیل بر صحت نوترکیبی همسان بین پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 و بکمید موجود در e.coli dh10bac بود. آثار ضایعات سلولی sf9 به دنبال تراریختی با بکمید نوترکیب، نشان دهنده تکوین موفق باکیلوویروس نوترکیب بود.آنالیز پروتیین‌های این سلول‌ها نشان داد هر سه پروتیین هدف به طور موثر و هم زمان بیان یافته‌اند.نتیجه‌گیری: باکیلوویروس نوترکیب ساخته شده در این طرح ویژگی‌های درست جهت قابلیت استفاده در تولید ذرات شبه ویروسی آنفلوانزا ویژه استرین خوکی را دارد. واژگان کلیدی: باکیلو ویروس، ساب تایپ h1n1، ویروس آنفلونزای تیپa، ذرات شبیه ویروس
|
|
کلیدواژه
|
باکیلو ویروس ,ساب تایپ H1n1 ,ویروس آنفلونزای تیپA ,ذرات شبیه ویروس ,Baculovirus ,H1n1 Subtype ,Influenza Avirus ,Virus-Like Particle
|
|
آدرس
|
دانشگاه صنعتی مالک اشتر, استاد یار، پژوهشکده علوم و فن آوری زیستی، گروه مهندسی ژنتیک، دانشگاه مالک اشتر، تهران، ایران, ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), کارشناس ارشد ویروس شناسی، مرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا ، تهران، ایران, ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), دانشیار، مرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا ، تهران، ایران, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
saberfar@yahoo.com
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|