بررسی پروتیین نوترکیب زیر واحد A پیلی ویبریو کلرا در اشرشیاکلی

چکیدهزمینه و هدف: ویبریوکلرا یک باکتری پاتوژن گرم منفی است که عامل بیماری اسهال است. یکی از مهم‎ترین عوامل بیماری‎زای باکتری، پیلی هم تنظیم شونده با توکسین است. این پیلی به عنوان اولین عامل در کلونیزاسیون و تداوم باکتری‎ها در روده کوچک مورد نیاز است.مواد وروش‎ها: در این تحقیق با استفاده از روش pcr، ژن پیلی هم تنظیم شونده با توکسین ویبریوکلرا تکثیر گردید. پس از تخلیص، ژن‎های فوق در پلاسمید 1t4pgex جهت بیان کلون شد. سپس ساختار پلاسمیدی نوترکیب وارد باکتری اشریشیاکلی شد. تولید پروتیین‎ها توسط iptg القا و بهینه سازی شرایط محیط کشت صورت گرفت. پروتیین‎های نوترکیب با استفاده از کیت گلوتاتیون s سفاروز خالص و آزمایش وسترن بلات برای تایید پروتیین نوترکیب انجام گرفت. میزان پروتیین‎ها با استفاده از روش برادفورد اندازه‎گیری شد.یافته‎ها: نتایج تحقیق حاضر بیان موفقیت آمیز پروتیین‎های نوترکیب در سلول اشرشیاکلی را ثابت کرد. پروتیین نوترکیب به وسیله کروماتوگرافی تمایلی تخلیص شد. الگوی واکنش این پروتیین‎ها با آنتی‎بادی‎های ضد آنها، نشان داد که این پروتیین‎ها خاصیت آنتی‎ژنیک دارند.نتیجه‎گیری: از آنجا که در این مطالعه نشان داده شد، این پروتیین‎ها دارای خاصیت آنتی ژنیسیته هستند، ممکن است به عنوان یک آنتی ژن مناسب برای واکسیناسیون باکتری ویبریوکلرا استفاده شود.واژگان کلیدی: واکنش زنجیره‎ای پلی مراز، ژن پیلی هم تنظیم شونده با توکسینa ، ویبریو کلرا