تغلیظ و تشخیص سریع باکتری ویبریو کلرا از آب با استفاده از روش‌های غیروابسته به کشت

زمینه و هدف: شناسایی مقادیر ناچیز باکتری آلاینده در آلودگی‌های میکروبی آب و مواد غذایی همواره از دغدغه‌های محققان بوده و هست. مرسوم‌ترین راهکار برای رفع این مشکل کشت باکتری برای افزایش تعداد باکتری‌هاست که این روش زمان تشخیص باکتری را به چندین ساعت یا چند روز افزایش می‌دهد. یکی از استراتژی‌های هوشمند برای رفع این مشکل، تغلیظ باکتری با روش‌های فیزیکی است. هدف از تحقیق حاضر غنی‌سازی باکتری ویبریو کلرا به عنوان مهم‌ترین میکروب آلوده‌کننده آب، با استفاده از روش فیلتراسیون و ارزیابی این عملکرد به کمک روش کشت و دو روش تشخیصی سنجش atp و pcr است.مواد و روش ها: غلظت معینی از باکتری ویبریو کلرا در حجم مشخصی از آب استریل به صورت مصنوعی انتقال داده شد؛ سپس با کمک فیلترهای 0.45 قابل جداسازی، باکتری از محیط استخراج و تغیلظ شد. درنهایت عملکرد روش بعد و قبل از فیلتراسیون با استفاده از کشت سلولی، سنجش atp و روش ملکولی pcr با پرایمرهای اختصاصی ژن ompw باکتری ویبریو کلرا، مقایسه شد.ملاحظات اخلاقی: با توجه به اینکه در این پژوهش آزمون‌های انسانی یا حیوانی انجام نشده است، دارای کد اخلاق و کد irct نیست.یافته ها: نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که این روش کارایی و عملکرد بازیافتی بالایی را نشان می‌دهد. به طوری که نمونه قبل از فیلتراسیون فاقد جواب مثبت در هر دو روش مذکور بوده است، حال آنکه پس از فیلتراسیون، در نمونه‌های جدا و بازیافت‌شده، حضور باکتری در هر دو روش سنجش atp و pcr رویت و اثبات شد.نتیجه گیری: در نتیجه با استفاده از این استراتژی می‌توان باکتری ویبریو کلرا را بدون نیاز به کشت، در کمترین زمان در نمونه‌های آب آلوده شناسایی کرد.

Enrichment and Rapid Detection of Vibrio Cholerae From Water by Non-culture Method

Background and Aim: In the microbial contamination of food and water, identifying the trace amounts of contaminating bacteria has always been of researchers rsquo; interest and concern. The most frequent approach to resolve this problem is using culturebased methods to increase and enrich bacteria samples; accordingly, it extends the bacterial detection process to several hours or days. One of the smart strategies to solve this problem is the concentration of bacteria using physical methods. The present study aimed to enrich Vibrio cholerae as the most essential waterpolluting germs. Accordingly, we used the filtration method and evaluated its function by culture method and two detection approaches of Adenosine Triphosphate (ATP) and PCR assay.Methods Materials: A certain concentration of V. Cholerae was artificially added to a specified volume of sterile water. Then, the bacteria were extracted from the medium and filtered using 0.450 micro;m separable filters. Finally, the performance of the pre and postfiltration processes was compared using bacterial cell culture (CFU), ATP, and PCR assay with the specific primers for the ompW gene of V. cholerae.Ethical Considerations: This article is a metaanalysis with no human or animal sample.Results: The present research results indicated that the applied method presented high efficiency and recovery performance. In other words, samples provided no positive response before filtration in both methods; however, after filtration in isolated and recovered samples, the presence of bacteria was detected in the ATP and PCR methods. Conclusion: In conclusion, the employed strategy can detect V. cholerae in nonculture and in the shortest time in contaminated water samples.