بررسی قابلیت تولید ‌سلول‌های پرتوان القایی از نمونه‌های زنوگرفت سرطان پانکراس انسان

زمینه و هدف: شواهدی وجود دارد که سلول های سرطانی در طی فرآیند شکل گیری و پیشرفت سرطان، ناهنجاری های اپی ژنتیکی را نیز علاوه بر جهش های ژنتیکی چندگانه متحمل می شوند. استفاده از فن آوری باز برنامه ریزی به عنوان ابزاری برای اعمال «فشار» و ایجاد تغییرات در تنظیم کننده های اپی ژنتیکی، می تواند به روشن کردن رفتار اپی ژنتیکی منحصر به سلول های سرطانی منجر شود. تاکنون، سلول های ips از سلول های پرایمری نرمال تولید شده اند، اما مشخص نیست که آیا سلول سرطانی اولیه انسانی نیز می تواند به سلول ips باز برنامه ریزی شود یا خیر. در این مطالعه، تولید سلول های ips از سلول های آدنوکارسینومای پانکراس با استفاده از عوامل رونویسی مورد بررسی قرار دادیم.مواد و روش ها: سلول های حاصل از نمونه های زنوگرفت pdac انسانی، با لنتی ویروس حاوی عوامل yamanaka (oskm) القا شده و در ادامه سلول های القا شده توسط رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز، real-time pcr و ایمونوسیتوشیمی تعیین هویت شدند.ملاحظات اخلاقی: مطالعه حاضر با کد اخلاقی ec/93/1025 در کمیته اخلاق پزشکی پژوهشگاه رویان پذیرفته شده است.یافته ها: رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز، real-time pcr و ایمونوسیتوشیمی نشان داد که القاء با عوامل رونویسی oskm منجر به تولید سلول های ips از سلول های فیبروبلاستی می شود، اما نه از سلول های pdac pdx. سلول های pdac نمی توانند به طور کامل با بیان چهار عامل رونویسی مجدد برنامه ریزی شوند.نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که سلول های سرطانی pdacpdx، با توجه به الگوی بیان ژن های اصلاح کننده اپی ژنتیکی آن ها، از سلول های القاشده pdac متفاوت بودند، هرچند بیان ژن های تکامل یافته در سلول های pdac القاشده به طور قابل توجهی افزایش نیافت.

Investigation the Ability to Produce Induced Pluripotent Cells from Human Pancreatic Cancer Xenografts

Background and Aim: There is increasing evidence that cancer cells in addition to multiple genetic mutations, also acquire epigenetic abnormalities during development, maintenance, and progression. By utilizing the reprogramming technology as a tool to introduce the lsquo;pressure rsquo; to alter epigenetic regulations, we might be able to clarify the epigenetic behavior that is unique to cancer cells. So far, iPSCs have been generated from normal primary cells, but it is unclear whether human primary cancer cell can be reprogrammed. We investigated the production of the iPS cells from the pancreatic adenocarcinoma cells using defined transcription factors.Materials and Methods: We sought to reprogram patient derived xenograft from human PDAC, by introducing lentiviral mediated induction of Yamanaka Factors (OSKM) and characterized of induced cells by Alkaline Phosphatase staining, RealTime PCR and immunostaining.Ethical Considerations: This study with research ethics code EC/93/1025 has been approved by research ethics committee at Royan Institute.Findings: Alkaline Phosphatase staining, RealTime PCR and immunostaining showed that induction with the OSKM results in generating iPS cell line from fibroblast cells but not from PDAC PDX cells .We showed that, PDAC cells could not fully reprogrammed by the expression of 4 transcription factors.Conclusion: This study demonstrated that the PDACPDX cancer cells were distinct from PDAC induced cells with regard to their epigenetic modifier genes expression pattern, although the expression of pluripotency genes did not increased significantly in the induced PDAC cells.