مطالعه اثر آلفاتوکوفرول بر تکثیر سلولی و آپوپتوزیس در سلول‌های بنیادی مزانشیم مغز استخوان رت

زمینه و هدف: آلفاتوکوفرول به عنوان یک آنتی اکسیدانت قوی نقش مهمی را در مهار رادیکال های آزاد ایفا می کند. هدف از این پژوهش، بررسی نقش آلفاتوکوفرول بر تکثیر سلولی و مهار آپوپتوزیس در سلول های بنیادی مزانشیم مغز استخوان رت بالغ است. مواد و روش ها: در این مطالعه پژوهشی، سلول های بنیادی مزانشیم مغز استخوان با روش فلشینگ تحت شرایط استریل استخراج و پس از پاساژ سوم به گروه های کنترل و دوزهای 15 و 25 میکرومولار آلفاتوکوفرول تقسیم شدند و به مدت 21 روز در محیط استئوژنیک شدند (محیط کشت سلولی حاوی 10 درصد سرم جنین گاوی، 10 میلی مولار بتاگلیسرول فسفات، 10 نانومولار دگزامتازون و 50 میکروگرم در میلی لیتر آسکوربیک 3 فسفات) تیمار شدند. سپس میزان تکثیرسلولی، آسیب dna ، سطح بیان ژن های bax و bcl-2 و هم چنین تغییرات موفولوژیک سلول ها، طی روند تمایز استئوژنیک مورد بررسی قرار گرفتند و داده ها با روش آماری تحلیل واریانس یک طرفه، تجزیه و تحلیل گردیدند و تفاوت میانگین ها در سطح p<0/05 معنی دار در نظر گرفته شد. نتیجه گیری: تکثیر سلولی، میزان قطر هسته و بیان ژن آنتی آپوپتوتیک bcl-2 در سلول های بنیادی مزانشیم تیمار شده با آلفاتوکوفرول، در رفتاری وابسته به دوز و در مقایسه با سلول های گروه کنترل از افزایش معنی داری برخوردار بودند(p<0/05). گسترش سیتوپلاسم نیز در سلول های تیمار شده با آلفاتوکوفرول در مقایسه با سلول های گروه کنترل مشاهده شد. از آن جایی که آلفاتوکوفرول، کاهش معنی داری در آسیب dna و بیان ژن آپوپتوتیک bax در مقایسه با گروه کنترل ایجاد می کند ، بنابراین می تواند آپوپتوزیس را در سلول های بنیادی مزانشیم مغز استخوان، در رفتاری وابسته به دوز مهار کند.

Studying the Effect of Alpha-Tocopherol on Cell Proliferation and Apoptosis in Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

Background: Alphatocopherol, as a strong antioxidant, plays an important role in testraining free radicals. The aim of this study was to investigate the effect of Alphatocopherol on cell proliferation and restraining apoptosis in rat bone marrow mesenchymal stem cells. Materials and Methods: In this research study, the rat bone marrow mesenchymal stem cells were extracted under sterile conditions using flashingout method. At the end of the third passage, cells were divided into groups of control and Alphatocopherol with doses of 15 and 25 micro;M and were treated in the osteogenic media cell medium containing 10% fetal bovine serum, 10 mM beta;glycerol phosphate, 10 nM dexamethasone and 50 micro;g/ml ascorbic 3phosphate] for a period of 21 days. Then, cell proliferation, DNA damage, expression of Bcl2 and Bax genes and the morphologic changes of the cells were investigated during the procedure of osteogenesis. Data were analyzed using oneway ANOVA and means difference was considered significant at p<0.05. Results: Cell proliferation, the size of nuclei diameter and expression of antiapoptotic Bcl2 gene showed a significant increase in mesenchymel stem cells treated with Alphatocopherol (p<0.05) in a dose dependent manner compared to the control cells. Also, cytoplasm extension was seen in the cells treated with Alphatocopherol, compared to the control group. Since Alphatocopherol causes a significant decrease in DNA damage and the expression of apoptotic Bax gene, compared to the control group, therefore it can suppress apoptosis in bone marrow mesenchymal stem cells, in a dose dependent manner .