بررسی اثر داروی سیس‌پلاتین و عصاره اوکالیپتوس بر روی بیان ژن kras در رده سلولی a549 سرطان ریه

زمینه و هدف: سرطان ریه یکی از همه گیرترین سرطان ها در سراسر جهان است. اخیراً چند انکوژن بالقوه شناخته شده اند که شامل egfr، braf، kras و ژن alk هستند. با توجه به شیوع بالای سرطان ریه، میزان مرگ ناشی از آن، عوارض شیمی درمانی و تلاش برای یافتن داروهای موثر و با عوارض کمتر، تحقیق حاضر با این هدف انجام شد که تاثیر یک عصاره گیاهی را بررسی کرده تا نتایج آن در اختیار مراکز تولیدی قرار گیرد.مواد و روش ها: در این تحقیق، تاثیر عصاره اوکالیپتوس و داروی سیس پلاتین بر روی میزان بیان ژن kras در رده سلولی a549 سرطان ریه بررسی شد. به منظور تعیین زنده مانی سلول ها از روش mtt استفاده و ic50 تعیین شد. پس از تعیین ic50سلول ها به مدت 48 ساعت در معرض تاثیر غلظتی کمتر از ic50 عصاره و دارو قرار گرفتند. سپس میزان بیان ژن kras نسبت به ژن کنترل β-actin در گروه های کنترل و تیمار با عصاره و دارو تعیین شد. بدین منظور، پرایمر اختصاصی برای ژن β-actin و kras طراحی و real-time pcr انجام شد.ملاحظات اخلاقی: این مطالعه با کد ir.iau.east tehran.rec.1396.3 در کمیته اخلاق پژوهشی دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شرق به تصویب رسیده است. یافته ها: نتایج نشان داد میزان ic50 عصاره و دارو به ترتیب 85.7 و 1.77 میلی گرم بر میلی لیتر بوده است. هم چنین، میزان بیان ژن ها در سلول های تیمار شده و کنترل با عصاره و دارو مقایسه گردید. بیان نسبی ژنkras به ژن مرجع در رده سلولی سرطانی تیمارشده با عصاره و دارو به ترتیب به میزان 2.89 و 9.25 برابر طی 48 ساعت به طور معنی دار (0=p) کاهش یافت.نتیجه گیری: با توجه به کاهش بیان نسبی ژن در رده a549 تیمار شده می توان به مطالعات آینده در خصوص درمان هدف مند سرطان ریه امیدوار بود و از این رو پتانسیل استفاده از ترکیبات گیاهی آشکارتر شود.

The Effect of Cisplatin and Eucalyptus Extract on KRAS Gene Expression in A549 Cell Line of Lung Cancer

Background and Aim: Lung cancer is one of the most contagious cancers in all of the world. Recently, several potential oncogenes and carcinogens have been identified, including EGFR, BRAF, KRAS and ALK genes. With due attention to the high prevalence of lung cancer, its death rate, the complications of chemotherapy and the efforts to find effective and less effective drugs, this study was done to investigate the effect of a plant extract so that results are available to manufacturing centers.Materials and Methods: In this study, the effect of Eucalyptus extract and cisplatin on the expression of KRAS gene in A549 lung cancer cell line was investigated. To determine the cell survival, MTT was used and IC50 was determined. After determining IC50, the cells were exposed to less than IC50 concentrations of the extract and drug for 48 hours. Then, the amount of beta;ACTIN and KRAS genes expressions in control and extract treated and drug treated groups were determined. For this purpose, a specific primers were designed for beta; ACTIN and KRAS, and RealTime PCR was be done.Ethical Considerations: This study with research ethics code IR.IAU.East Tehran.REC.1396.3 has been approved by research ethics committee at Islamic Azad University, Tehran East Branch, Iran.Findings: The results showed that the amount of IC50 of the extract and drug was 8.75 and 1.77 mg/ml, respectively. In addition, the expression of genes in control and treated cells with extract and drug was compared. The expression of the KRAS gene relative to the reference gene in the cancer cell line treated with extract and drug, for 48 hours, was significantly decreased 2.89 and 9.25, respectively (p = 0).Conclusion: Regarding the reduction of the relative gene expression in the A549 treated group, future studies on targeted lung cancer treatment can be promising and the potential for the use of plant compounds is more evident.