بیماریزایی و تنوع ژنتیکی استرین‌های Clavibacter michiganensis subsp. insidiosus عامل بیماری پژمردگی یونجه در استان همدان

یونجه (medicago sativa) از گیاهان مهم علوفه ای و استان همدان منطقه‌ای مناسب برای رشد آن است. پژمردگی باکتریایی یونجه که توسط clavibacter michiganensis subsp. insidiosus ایجاد می‌شود، یکی از بیماریهایی است که سبب کاهش محصول در این استان می‌شود. این بیماری تاکنون به صورت جامع در استان همدان مورد بررسی قرار نگرفته است. در این بررسی از مناطق مختلف یونجه کاری استان همدان نمونه‌برداری و باکتری عامل بیماری پژمردگی جدا شد. بیماریزایی استرین‌های جدا شده روی یونجه تحت شرایط گلخانه با سه تکرار تایید شد. استرین‌های مورد بررسی پس از گذشت 40 روز در بوته ها علایم بیماری را ایجاد کردند. با بررسی ویژگی های فنوتیپی استرین‌های عامل بیماری پژمردگی یونجه به عنوان c. m. subsp. insidiosus تشخیص داده شدند. تاثیر استرین‌های جدا شده بر طول ساقه و ریشه، و وزن تر و خشک بوته های آلوده در قالب طرح کاملاً تصادفی با چهار تکرار ارزیابی شد. داده ها توسط نرم افزار sas و آزمون دانکن مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج نشان داد که استرین‌های مورد بررسی سبب کاهش شاخص های طول و وزن بوته های یونجه شده و از نظر تاثیر روی کاهش این شاخص ها با هم تفاوت معنی دار دارند. برای بررسی تنوع ژنتیکی استرین‌ها، واکنش زنجیره ای پلیمراز با آغازگرهای تصادفی opa-03، opa-15، opb-10، opb-15، opb-18، opb-20، ope-01، ope-02، ope-03، ope-04، ope-07، ope-14، ope-16 و ope-19 به کار رفت و خوشه بندی انجام شد. بر مبنای این روش استرین‌های مورد بررسی چهار کلاستر تشکیل دادند. استرین‌های ah7، ah8، ah9 و ah6 در یک کلاستر، ah15 و ah2 در کلاستر دوم، ah10، ah11، ah12 و ah14 در کلاستر سوم و ah1 و ah3 در کلاستر چهارم قرار گرفتند. با هضم قطعه تکثیر شده با پرایمرهای cirs-1 و cirs-2 توسط آنزیم ecori استرین‌های مورد بررسی دو گروه شامل استرین‌هایah1، ah2،ah3، ah7،ah8 ah11، ah12 و ah15 با داشتن دو باند و استرین‌های ah6، ah10 و ah14 با دارا بودن تنها یک باند را تشکیل دادند. داده های به دست آمده تنوع ژنتیکی استرین‌های c. m. subsp. insidiosus را در استان همدان نشان داد.