بررسی تاثیر ژن atexpa18 آرابیدوپسیس بر صفات ریشه و بذر لاین های تراریخته توتون

اکسپنسین‌ها پروتئین‌های غیر‌آنزیمی موجود در دیواره سلولی می‌باشند که عامل اصلی برای طویل شدن سلول محسوب می شوند. انعطاف پذیری دیواره سلول گیاهی به واسطه اسیدی شدن و فعال شدن اکسپنسین‌ها تنظیم می‌گردد. در این تحقیق تاثیر انتقال ژن atexpa18 بر ریشه و بذر لاین‌های توتون تراریخته بررسی شد.‌ برای اثبات تراریختگی گیاهان پس از استخراج rna ، cdna ساخته شد و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی ‌شده ژن برای atexpa18 آزمایش pcr صورت گرفت. بذور در محیط کشت انتخابیms  حاوی کانامایسین کشت ‌شدند. گیاهچه‌های تراریخته در محیط کشت حاوی کانامایسین به خوبی رشد کردند ولی گیاهچه‌های غیر‌تراریخته سفید شدند و از بین رفتند. سپس گروهی از این گیاهان تراریخته به گلخانه و گروهی به ‌منظور بررسی صفات مورفولوژیک ریشه به گلدان‌های حاوی محلول غذایی هوگلند منتقل‌شدند. بررسی‌های گلخانه‌ای نشان داد گیاهان تراریخته نسبت به گیاهان غیرتراریخته در صفت‌هایی از جمله وزن بذر، وزن کپسول و وزن صد دانه بهتر عمل کردند. گیاهان تراریخته رشد کرده در هوگلند نسبت به گیاهان غیرتراریخته در صفت‌های وزن‌تر و خشک اندام هوایی و ریشه، و ارتفاع ریشه بهتر بودند. به صورت کلی لاین تراریخته l4 بهترین عملکرد را در بین لاین‌های تراریخته از خود نشان داد.

Evaluation of the effect of AtEXPA18 Arabidopsis gene on root and seed traits of tobacco transgenic lines

Expansins are non enzymatic proteins in the cell wall, which are the main factor for cell elongation.The flexibility of the plant cell wall is regulated by acidification and activation of expansins. In this study, the effects of transferred AtEXPA18 gene on transgenic tobacco plants were investigated. To confirm the transgenic plant, RNA was extracted from the plant leaf sample and then cDNA was synthesized. After that PCR was done via a specific primer of the AtEXPA18 gene. Seeds were cultured in selective MS medium containing kanamycin. Transgenic seedlings tolerate medium which contains kanamycin and Non transgenic seedlings got white and died. Subsequently, some of these seedlings were grown in the greenhouse and others were grown in Hoagland nutrient solution for evaluating root morphology. Greenhouse studies showed that the transgenic plants were better than non transgenic plants in some traits such as seed weight, capsule weight, and 100 seed weight. Transgenic plants grown in Hoagland were better than non transgenic plants in some other traits like shoot and root dry weight, and root length. Consequently, L4 transgenic line had the best performance among transgenic lines.