|
|
|
|
بیان توالی کدکنندۀ پروتئین شیمریک ipad stxb در باکتری e. coli و کاهو
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
چقاکبودی زینب ,عباسی علیرضا ,هنری حسین ,اٌرزاز دیگو ,ابوئی مهریزی فریبا ,علیزاده هوشنگ
|
|
منبع
|
علوم گياهان زراعي ايران - 1398 - دوره : 50 - شماره : 2 - صفحه:209 -221
|
|
چکیده
|
شیگلوز، یک بیماری عفونی است که توسط شیگلا ایجاد میشود. پروتئینipadیکی از مهم‌ترین عامل‌های بیماری‌زا در شیگلا است. برای تولید پروتئین نوترکیب، توالی کدکنندۀ ipad stxb همسانه سازی و به ناقل بیانی pet28a(+) منتقل و توسط pcrو هضم آنزیمی تایید شد. بیان پروتئین نوترکیب در باکتری (bl21)e. coli با sds page، آزمون الایزا و لکه‌گذاری وسترن تایید شد. در این تحقیق پروتئین نوترکیب حدود 54.87 درصد پروتئین کل باکتری را به خود اختصاص داد. ناقل بیانی گیاهی واجد توالی کدکنندۀ ipad stxb با روش golden braid 3.0ساخته و با کمک اگروباکتریوم سویۀ c58 در کاهو به‌صورت موقت بیان شد. بیان پروتئین نوترکیب ipad stxbدر سطح رونویسی (ترانسکریپتوم) با qrt pcrودر سطح پروتئین با آزمون الایزا تایید شد.
|
|
کلیدواژه
|
ipad، stxb، آزمون الایزا، کاهو، وسترن بلاتینگ
|
|
آدرس
|
دانشگاه تهران،پردیس کشاورزی و منابع طبیعی, گروه زراعت و اصلاح نباتات, ایران, دانشگاه تهران،پردیس کشاورزی و منابع طبیعی, گروه زراعت و اصلاح نباتاتٍ, ایران, دانشگاه امام حسین, ایران, دانشگاه پلی تکنیک والنسیا, گروه بیوتکنولوژی سلولی و مولکولی, اسپانیا, دانشگاه تهران،پردیس کشاورزی و منابع طبیعی, گروه زراعت و اصلاح نباتات, ایران, دانشگاه تهران،پردیس کشاورزی و منابع طبیعی, گروه زراعت و اصلاح نباتات, ایران
|
|
پست الکترونیکی
|
halizade@ut.ac.ir
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Expression of Schemeric Protein Coding ipaD+stxB in E.coli and Lettuce
|
|
|
|
|
Authors
|
Chaghakaboodi Zeinab ,Abbasi Alireza ,Honari Hossein ,Orzaez Diego ,Abooie Mehrizi Fariba ,Alizadeh Houshang
|
|
Abstract
|
Shigella dysenteriae as the primary cause of epidemic diarrhea have been reported. Shigellosis is an infectious disease caused by Shigella. The IpaD protein is one of the most important virulence factors in Shigella. For production of recombinant protein, coding sequence of ipaD+stxB cloned to pET28(a) exprsson vector and cloned gene confimed by PCR and restriction enzyme digestions. Coding sequence expressed in E. coli (BL21) was confirmed by SDS PAGE, ELISA and Western blot. The recombinant protein accounted for about 54.87% of total bacterial proteins. Plant exprssion vector constructed via Golden Braid method. Transient expression of ipaD+stxB in lettuce performed with agrobacterium C58 strain and was confirmed at the level of transcriptome and protein through RT PCR and ELISA assay.
|
|
Keywords
|
ipaD ,StxB
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|