بررسی درون‌شیشه‌ای دو گونۀ سرخدار ازنظر تنوع اندوفیتی و تغییرات پاکلی‌تاکسل

امروزه با‌توجه‌به رشد کند گیاه سرخدار و اهمیت متابولیت‌های آن، اندوفیت‌های بیوسنتزکنندۀ ترکیبات ارزشمند سرخدار اهمیت پژوهشی زیادی یافته‌اند؛ به‌طوری‌که تولید پاکلی‌تاکسل در سلول گیاهی بدون اندوفیت غیرممکن تلقی می‌شود. در پژوهش حاضر سعی شده است علاوه‌بر بررسی تغییرات کیفی کالوس از نظر پاکلی‌تاکسل در شرایط درون‌شیشه‌‌ای، وضعیت اندوفیتی کالوس بررسی شود؛ به این منظور، آزمایشی با سه سطح 1، 2 و 3 میلی‌گرم‌در‌لیتر 2,4d و دو سطح 0.5 و 0.2 میلی‌گرم‌در‌لیتر کینتین برای دو گونۀ سرخدار (taxus baccata و taxus brevifolia) طراحی و اجرا شد و درنهایت، میزان پاکلی‌تاکسل و وضعیت اندوفیت در کالوس بررسی شد. پس‌از گذشت 3 ماه از زمان کشت، قارچ‌های اندوفیت به تعداد 9 کلنی در کالوس ساقۀ هر دو گونه و برگ گونۀ t. baccata ظاهر شدند. قارچ‌ها بر اساس ریخت‌شناسی و نوع اندام زایشی مانند تشکیل هاگ و نوع هاگ شناسایی شدند. از میان اندوفیت‌های یافت‌شده، تنها aspergillus flavus با ویژگی‌های شاخص کنیدی، سلول فیالید و کنیدیفور شناسایی شد و سایر نمونه‌های قارچی مشاهده‌شده فاقد اسپور بودند یا حالت پیکنیدیوم داشتند. اگرچه بررسی‌های مولکولی و بیوشیمیایی اندوفیت‌های جداسازی‌شده از کالوس توانایی تولید پاکلی‌تاکسل در آنها را نشان ندادند، ردیابی اندوفیت در کالوس سرخدار که برای نخستین‌بار گزارش می‌شود، نقطۀ عطفی در درک بهتر جایگاه میزبان و اندوفیت در تولید متابولیت ارزشمند پاکلی‌تاکسل به‌ویژه در کشت بافت است.

In vitro study of two species of yew tree in terms of endophytic diversity and paclitaxel variation

Due to the slow growth of the yew tree and importance of its metabolites, today, the paclitaxel producing endophytes have been found to be of great research interest. To that extent, in no presence of endophyte, the production of taxol in plant is not possible. In the present study, it has been tried beside the investigation of the qualitative changes of callus from the point of paclitaxel, the endophytic situation of it also be studied. For this purpose, an experiment was conducted with three levels of 1, 2 and 3 mg/L of 2, 4D, and two levels of 0.5 and 0.2 mg/L of Kinetin in two species of T.baccata and T.brevifolia. Finally, the amount of paclitaxel and the endophytic status in callus were studied. After 3 months of cultivation, 9 colonies of the endophytic fungi appeared in the callus of both species and leaves of T.baccata. The isolated fungi were identified based on their morphology and reproductive organs, such as the formation of spores. Although molecular and biochemical studies of isolated endophytes did not show the ability to produce taxol in them, endophytic fungi in the yew callus, which was first reported, could be a turning point in a better understanding of host and endophytic fungi in the production of valuable metabolites of paclitaxel, especially in cell and hairy root cultures.