اثر آنتی‌اکسیدانی سیلیمارین بر یکپارچگی غشای‌پلاسمایی، زنده‌مانی و جنبایی اسپرم منجمد قوچ قزل

زمینه مطالعاتی: تحقیقات اخیر نشان داده که گونه‌های فعال اکسیژن در تنظیم فعالیت فیزیولوژیک اسپرم نقش دارد. طی حفاظت انجمادی ، اسپرم در معرض شوک سرمایی و فشاراسمزی قرارمی‌گیرد. سیلیمارین ماده موثره عصاره گیاه خارمریم به عنوان یک آنتی‌اکسیدان قوی قابلیت مهار استرس اکسیداتیو را دارد. هدف: این پژوهش با هدف بررسی اثر سیلیمارین بر ذخیره‌سازی اسپرم قوچ انجام شد. مواد و روش‌ها: جمع‌آوری منی دوبار در هر هفته از 4 راس قوچ نژاد قزل خالص از هر قوچ 6 بار اسپرم‌گیری صورت گرفت. منی جمع‌آوری شده با رقیق‌کننده ی بدون آنتی‌اکسیدان (شاهد) و سیلیمارین 5 و 10 میکروگرم در میلی‌لیتر مخلوط شده و پس از سردسازی به مدت 90 دقیقه در یخچال و رسیدن به دمای 5 درجه سانتی‌گراد، به مدت 10 8 دقیقه در 4 سانتی‌متری بالای سطح نیتروژن مایع قرار گرفت و سپس در داخل نتیروژن مایع غوطه‌ور گردید. خصوصیات کیفی اسپرم شامل زنده‌مانی، حرکت کل، حرکت پیش‌رونده، یکپارچگی غشای پلاسمایی در روز‌های صفر، 15، 30 آزمایش بررسی شد. نتایج: یافته های آزمایش نشان داد که رقیق‌کننده‌های حاوی سطوح محتلف سیلیمارین نسبت به گروه شاهد به طور معنی‌دار باعث افزایش حرکت کل، حرکت پیشرونده، زنده‌مانی اسپرم قوچ پس از فرایند انجماد‌ یخ‌گشایی شدند. افزودن غلظت‌های مختلف سیلیمارین به ترتیب 5 و 10 میکروگرم با میانگین 74.45 و 67.33 درصد در مقایسه با گروه کنترل باعث افزایش معنی‌دار تحرک کلی اسپرم با میانگین 68.07 و 60.95 درصد باعث افزایش معنی‌دار تحرک پیشرونده اسپرم منجمد قوچ پس از یخ گشایی شدند (p<0/01). با توجه به نتایج به دست آمده حرکت درجا در گروه شاهد (0.92 ± 5.92) نسبت به سطح 5 و 10میکروگرم سیلیمارین به ترتیب، ( 0.92± 6.38) و( 0.92± 8.31) کمترین مقدار،ولی معنی‌دار نبود. نتیجه نهایی: افزودن 5میکروگرم سیلیمارین به رقیق‌کننده انجماد اسپرم قوچ موجب بهبود پارامترهای کیفیتی اسپرم ازجمله تحرک، زنده‌مانی و تست هاست پس از یخ‌گشایی شد

effect of silymarin antioxidant on the membrane integrity, viability and motility of ram frozen sperm

effect of silymarin antioxidant on the membrane integrity, viability and motility of ram frozen spermabstract:introduction: the need for artificial insemination in the ewe is to access fresh and frozen sperm. cryopreservation is a suitable method for long term storage of semen and sperm, but may cause a minor irreversible damage to the sperm cell, especially its membrane region (khorramabadi et al., 2017). the oxidation of fatty acids leads to the production of free oxygen radicals (ros). these radicals are necessary in normal conditions for certain physiological activities and sperm processes, but excessive production of ros in the sperm can reduce membrane fluidity, dna fracture, damage to proteins, and ultimately reduced sperm motility and fertility. (bakhshayesh et al., 2017). silymarin, the scientific name of silbum marianum, is the english name milk thistle and is a potent inhibitor of oxidative stress as a potent antioxidant. due to the nature of its friend fat, silymarin is firmly attached to the plasmid membrane compounds, thus preventing fracture and its collapse by increasing membrane strength. increasing the amount of active oxygen species and lipid peroxidation disrupts mitochondrial membrane, decreases atp and damage to sperm acesomes, which ultimately reduces the progression of sperm motility. (kvasnikova et al., 2003). the mechanism of action of salimarin is through stimulation of the ribosomal rna and protects the membrane from oxidative damage. they also stated that silymarin stimulates the activity of the antioxidant enzymes of superoxide dismutase (sod) and glutathione peroxidase (wellington and jarvis, 2001) . silymarin improves the sperm motility and survival, sperm abnormalities, and preservation of the sperm membrane after freezing thawing. improvement of semen quality in both freezing and cooling is due to the strong silicomain antioxidant capacity (fakorzai et al., 2008; longpyram et al., 2013). . objective: regarding the anti oxidant effects of silymarin, this study aimed to investigate the effect of silymarin on storage of ram sperm. materials and methods: in this research, four rams of pure ghee were used 2 3 years old and each ram was 6 times sperm. sperm was performed twice a week by artificial vagina. after the sample was transferred to the laboratory, a series of preliminary evaluations including sample size, sample color, wave motion, total mobility, in situ motion, progressive motion and live weight, and abnormal sperm and density were performed. if standards were met, necessary (scaling over 2.5 billion sperm and progressive movement above 70%) dilution was performed with treatments. the diluents were prepared prior to sampling and placed in a bin marie temperature of 37 ° c. tris based diluent was used to contain 2.73 g of tries, 1.4 g of fructose, 1 g of citric acid and 100 mg streptomycin in 100 ml sterile distilled water. to prepare the diluent, 73% of the prepared solution will be mixed with 20% egg yolk and 7% glycerol. in order to dilute the sprays from trace based diluent, egg yolk, semen collected with diluent without antioxidants (control) and silymarin 5 and 10 μg / ml mix after cooling for 90 minutes in the refrigerator and reaching 5 ° c, it was placed in 4 cm above the liquid nitrogen for 8 10 minutes and then immersed in liquid nitrogen.