بررسی توان پروبیوتیکی باکتری‌های اسید لاکتیک جدا شده از دستگاه گوارش زنبور عسل و تاثیر آنها بر برخی فراسنجه‌های عملکردی کلنی‌ها

هدف از این مطالعه جداسازی باکتری‌های اسید لاکتیک از دستگاه گوارش زنبور عسل و توان پروبیوتیکی جدایه‌ها و تاثیر آنها بر برخی فراسنجه‌های عملکردی کلنی‌ها بود. بدین منظور از زنبورستان با یکصد کلنی زنبور عسل، تعداد 10 کلنی به‌صورت تصادفی انتخاب و جهت نمونه‌گیری استفاده شدند. تعداد 20 زنبور کارگر از هر کندو گرفته و پس از انتقال به آزمایشگاه تحت شرایط کامل آسایش و هوارسانی، با آرامش تحت محیط حاوی دی اکسید کربن، دستگاه گوارش آنها به‌صورت کامل جداسازی شد و پس از کشت در محیط mrs کلنی های میکروبی متفاوت انتخاب و کشت‌های تناوبی مایعجامد تا 8 مرحله برای رسیدن به کشت‌های خالص تکرار شد. درنهایت نمونه‌های گرم مثبت و کاتالاز و همولایز منفی جدا شده و مورد آزمون تشخیص فیلوژنی قرار گرفتند. نتایج شناسایی باکتری‌های جداسازی‌شده بر اساس توالی‌های 16s rrna نشان داد جدایه g1 (سویه ma4) با 99 درصد شباهت با پدایوکوکوس اسیدی لاکتیسای قرابت داشت، جدایه g2 به دلیل مشکلات فنی در ارسال نمونه‌ها به خارج از کشور توالی یابی نشد و جدایه g3 (سویه ma5) نیز با 99 درصد شباهت به پدایوکوکوس اسیدی لاکتیسی سویه 8185 شباهت داشت و درنهایت سویه ma14 جدا شده از دستگاه گوارش زنبورعسل در فصل تابستان در شرایط بی‌هوازی با 97 درصد نزدیکی به پدایوکوکوس پنتوسوس سویهhm751 شباهت داشت که g4 نامگذاری شد. این باکتری‌ها در بانک اطلاعات ژنی (ncbi) به ترتیب با شماره‌های mw376601، mw376904، mw376896 و mw405566 ثبت گردیدند. در مطالعات بالینی و مزرعه‌ای نیز اثر مثبت تیمار با جدایه‌ها به دو روش اسپری بر روی قاب ها و کشت در شربت بر تخم‌ریزی و تولید و رفتار بهداشتی زنبور عسل مشاهده گردید و مقایسه تیمارها با آزمون چند دامنه دانکن (p≤%5) نشان داد همه تیمارهای آزمایشی در فاکتورهای کمی جمعیت و تخم‌ریزی و صفات کیفی مانند رفتار نظافت‌گری تفاوت معنی‌داری نسبت به تیمار شاهد داشتند، تیمار شاهد نسبت به تیمارهای آزمایشی، تفاوت معنی‌داری در ذخایر عسل کاهش داشت (p≤%5) که می تواند به دلیل تخم‌ریزی کمتر و مصرف شهد کمتر باشد.

evaluation of probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from bee gastrointestinal tract and their effect on some productive parameters of colonies

this study aimed to isolate lactic acid bacteria from gastrointestinal tract of honey bees (apis mellifera) and assess the probiotic potential of isolates, and their effect on some performance parameters of colonies. thus, 10 colonies out of an apiary with one hundred bee colonies were randomly selected and used for sampling. twenty worker bees were sampled from each hive and after being transferred to the laboratory under complete comfort and ventilation conditions, their gastrointestinal tract was completely isolated under carbon dioxide flushing, and after culture in mrs medium different microbial colonies were selected. liquidsolid periodic cultures were repeated up to 8 steps to achieve pure cultures. finally, grampositive, catalase and hemolysis negative samples were isolated and identified based on phylogenetic analysis. the results of identification of the isolated bacteria using 16s rrna sequences showed that g1 isolate (ma4 strain) was 99% similar to pediococcus acidilactica, the g2 isolate could not be sequenced due to technical problems in sending samples abroad and isolate g3 (strain ma5) was 99% similar to lactic acid pediococcus strain 8185. finally, the strain ma14 isolated from the bee's gastrointestinal tract during the summer under anaerobic conditions was 97% similar to the hm751 strain pediacocus pentosus, which was named g4. these bacteria were registered in the gene bank (ncbi) with accession number of mw376601, mw376904, mw376896 and mw405566, respectively. in vivo studies showed the positive effects of treatment with isolates by spraying on frames and bacterial culture mixed in syrup (sugarwater) on spawning, production and hygienic behavior of bees. comparison of treatments with duncan's multiple range test (p≤ 5%) showed that all experimental treatments in quantitative population factors and spawning and quality were significantly different from the control treatment. however, the control treatment had a significant difference in honey reserves due to low spawning compared to experimental treatments and less nectar consumption.