بررسی سرولوژیکی و مولکولی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (TSWV) در استان خراسان رضوی

به منظور بررسی ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی tomato spotted wilt virus(tswv) در سال های زراعی 1387 و 1388 از مزارع استان خراسان رضوی ( شهرستان های مشهد، نیشابور، قوچان، کاشمر، تربت حیدریه، فریمان، رشتخوار، تخت جلگه ) تعداد 636 نمونه گوجه فرنگی جمع آوری شد. نمونه هایی که دارای علایم رنگ پریدگی، بافت مردگی و لکه های حلقوی بودند جمع شده و در شرایط خنک به آزمایشگاه انتقال داده شدند. در آزمایشگاه به منظور ارزیابی وجود ویروس در نمونه های مشکوک، آزمون سرولوژیکی tas-elisa انجام شد و نمونه های آلوده به ویروس که در آزمون الایزا مشخص شدند به 3 رقم توتون nicotiana rustica ، nicotiana clevelandii و nicotiana tabacum var samson مایه زنی گردیدند و پس از ظهور علایم با آزمون tas-elisa آزمایش شدند. در شناسایی مولکولی نمونه های آلوده به ویروس با استفاده از محلول (-plus)™rnx استخراج rna صورت گرفت و با استفاده از آغازگر اختصاصی در واکنش rt-pcr قطعه ای در محدوده باندی bp276 تکثیر یافت. نتایج حاصل از آزمون tas-elisa و rt-pcr وجود ویروس را در مزارع گوجه فرنگی استان خراسان رضوی به اثبات رساند. در آزمون مایه زنی مکانیکی ویروس مورد مطالعه تنها در توتون nicotiana tabacum var samson ( تغییر شکل برگ ها و ابلقی ) علایم مشخص بیماری را نشان داد.