تراسفکشن پایدار سلول‌های استرومایی مغز استخوان توسط وکتورpSecTag2/HygroA-CNTF به‌منظور استفاده در درمان ضایعات نخاعی

مقدمه و هدف: ژن (cntf) که یکی از اعضای خانواده ژن‌های نوروتروفیک است، در محافظت بقا گانگلیون‌های سیلیاری و نورونی شرکت‌دارد. cntf تمایز و بقای گونه‌های مختلف نورون‌های حسی ، حرکتی، اتونوم و الیگودندروسیت‌ها را افزایش‌می‌دهد. به‌منظور افزایش خاصیت نوروتروفیکbmscs پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf ساخته‌ و با استفاده از لیپوفکتامین وارد سلول‌های bmscs شد. مواد و روش‌ها: پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf ساخته‌شد و با استفاده از سکانسینگ مورد تایید قرارگرفت و با استفاده از لیپوفکتامین به سلول‌های bmscs، وارد شد.میزان رونویسی در ژن مورد نظر توسط rt-pcr محاسبه و میزان بیان پروتیین با استفاده از وسترن بلات و الیزا بررسی‌شد. نتایج: سکانسینگ نشان‌داد که پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf، دارای توالی صحیحی است. پس از ترانسفکشن، بیان ژن cntf و بیان پروتیینی آن با استفاده از rt-pcr و وسترن بلات تاییدشد. نتیجه‌گیری: پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf با داشتن بیان مناسب در سلول‌های bmscs می‌تواند درصورت پیوند، سبب افزایش بازسازی سلول‌های آسیب‌دیده پس از ضایعه نخاعی شود.