بررسی کارایی جداسازی و کشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی پرده آمنیون انسان در محیط کشت سلولی

مقدمه و هدف: کارایی تکنیک های جداسازی، کشت و مشخصه یابی بیولوژیکی سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق شده از پرده آمنیون با چالش های جدی روبروست. هدف از مطالعه‌ حاضر بررسی کارایی جداسازی و کشت و تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق شده از پرده آمنیون در محیط کشت سلولی می‌باشد. مواد و روش ها: طی این تحقیق تجربی آزمایشگاهی، 10 نمونه جفت از مادران باردار طی سزارین تهیه و پرده آمنیون جداسازی شد. پروتکل جداسازی و کشت سلول‌های مزانشیمی به روش آنزیمی بهینه سازی شد. ویژگی‌های مورفولوژیک سلول‌های مزانشیمی با استفاده از میکروسکوپ اینورت بررسی شد و مشخصه‌های بیولوژیک آنها با استفاده از فلوسایتومتری بررسی گردید و ظرفیت تمایزی سلول‌های مزانشیمی با استفاده از ظرفیت تمایز آنها به سلول‌های استخوانی و چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. داده ها با استفاده از آمار توصیفی تجزیه و تحلیل شدند. نتایج: بیان مارکرهای cd44، cd73، cd90 و cd29 در سلول‌های مشتق شده از پرده آمنیون انسان در حد معناداری بود. مارکرهای cd14، cd34 و cd45 بیان نشده یا به میزان کمی بیان شدند. این سلول‌ها قابلیت زنده مانی بالایی داشتند و به طور موفقیت آمیزی به سلول‌های استخوانی و چربی تمایز یافتند نتیجه‌گیری: پروتکل استفاده شده در این مطالعه جهت جداسازی و کشت سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از پرده آمنیون انسان از کارایی بالایی جهت تولید سلول‌های بنیادی مزانشیمی به منظور استفاده در سلول درمانی و مهندسی بافت برخوردار بود.

The efficacy of isolation and culture of human amniotic mesenchymal stem cells in cell culture medium

Background and Objective: He efficacy of methods for amniotic membranederived mesenchymal stem cells isolation, culture, and biological characterization faces serious challenges. The present study aimed to investigate the efficacy of methods for amniotic membranederived mesenchymal stem cells isolation, culture, and differentiation in cell culture. Materials and Methods: In this experimental laboratory study, ten placenta specimens were obtained from pregnant mothers during cesarean section and amniotic membranes were separated. The protocol for isolation and culture of mesenchymal cells was optimized by enzymatic method. The morphological characteristics of mesenchymal cells were examined by invert microscopy and biological characteristics were measured by flow cytometry and differentiation capacity was evaluated by mesenchymal cells capacity to differentiate to osteocyte and adipocyte. Data were analyzed using descriptive statistics. Results: The expression level of CD44, CD73, CD90, and CD29 was significant in cells isolated from the human amniotic cell membrane. CD14, CD34, and CD45 were not expressed or slightly expressed. The cells had high viability and successfully differentiated into osteocyte and adipocyte. Conclusion: The protocol used in this study to isolate and culture human amniotic membranederived mesenchymal stem cells was highly efficient to prepare mesenchymal stem cells for cell therapy and tissue engineering.