بررسی اثرات عصاره آبی سیر بر میزان بیان ژن و پروتئین Tgf-Β2 در بافت شبکیه چشم رت های نر دیابتی نوع 1

مقدمه: رتینوپاتی یکی از مهم ترین عوارض دیابت ملیتوس می باشد که در نتیجه هیپرگلیسمی مزمن، استرس اکسیداتیو و التهاب ایجاد می شود. فاکتور رشد توموری (tgf-β2) یکی از فاکتورهای مهم دخیل در مسیر التهاب ناشی از هیپرگلیسمی می باشد. از طرفی سیر به عنوان یک ترکیب گیاهی پرمصرف در رژیم غذایی ایرانیان به حساب می آید که اثرات هیپوگلیسمیک و آنتی اکسیدانی دارد، لذا در این مطالعه اثرات عصاره آبی این گیاه در میزان بیان ژن و پروتئین tgf-β2 در رت های دیابتی نوع 1 مورد مطالعه قرار گرفته است.روش کار: در این مطالعه تجربی بیست و چهار رت نر نژاد ویستار به چهار گروه 6 تایی کنترل سالم، دیابتی نوع 1، دیابتی نوع 1 درمان شده با عصاره سیر و کنترل سیر تقسیم شدند. برای القا دیابت از استرپتوزوتوسین (65mg/kg) (stz) استفاده شد و هفت روز بعد از تزریق، میزان قند خون در رت ها توسط گلوکومتر اندازه گیری شد. قند بالاتر از mg/dl 300 به عنوان دیابت نوع 1 در نظر گرفته شد. تیمار رت ها توسط عصاره آبی سیر (100g/1ml) به صورت گاواژ به مدت 30 روز انجام شد. در پایان زمان تیمار، نمونه سرم آنها جداسازی شد و جهت سنجش میزان گلوکز در 20°c- ذخیره گردید. همچنین چشم رت ها و سپس بافت شبکیه آن ها سریعاً خارج شد و در 70°c- برای بررسی بیان ژن و میزان پروتئین، ذخیره شد. جهت بررسی بیان ژن، استخراج rna، سنتز cdna و real time pcr انجام شد. جهت سنجش میزان پروتئین tgf-β2 از روش الایزا استفاده شد.یافته ها: میزان بیان ژن tgf-β2 در رت های دیابتی، افزایش 37/1 برابری را نسبت به گروه کنترل نشان داد، در حالیکه در رت های دیابتی تیمار شده با عصاره سیر، کاهش 96/1 برابری نسبت به گروه دیابتی درمان نشده مشاهده گردید. میزان پروتئین tgf-β2 در رت های دیابتی، افزایش 08/3 برابری را نسبت به گروه کنترل نشان داد، در حالیکه در رت های دیابتی تیمار شده با عصاره سیر، کاهش 56/2 برابری نسبت به گروه دیابتی درمان نشده مشاهده گردید.نتیجه گیری: عصاره سیر سبب کاهش معنی دار سطح tgf-β2 در بافت شبکیه رت های دیابتی شده است. از آنجائیکه tgf-β2 یک فاکتور اساسی در ایجاد التهاب و آسیب به شبکیه می باشد، لذا می توان انتظار داشت که مصرف سیر، با کاهش میزان این پروتئین بتواند در تقلیل عوارض دیابت موثر باشد.

The Effects of Aqueous Garlic Extract on TGF-β2 Gene and Protein Expression in Retinal Tissues of Male Diabetic Rats

Introduction: Retinopathy is one of the most important complications of diabetes mellitus that results from chronic hypeglycemia, oxidative stress and inflammation. Tumor necrosis factorbeta2 (TGF beta;2) is an important factor in the inflammation pathway due to hyperglycemia. Garlic is one of the most frequently used plants in Iranian diets that has hypoglycemic and antioxidant propertis. So, this study aimed to examine the effects of aqueous garlic extract on TGF beta;2 gene and protein expression in retinal tissues of type 1 diabetic rats.Methods: In this experimental study, 24 male Wistar rats were divided into four groups (n = 6) including control rats, type 1 diabetic rats, type 1 diabetic rats treated with the garlic extract and garlic control. To induce diabets type 1, streptozotocin (STZ, 65 mg/kg) was used. Seven days after the STZ injection, the glucose level was measured by a glucometer. at the end of the treatment period(30 days, gavage of the garlic extract (1mL/100g)), the serum sample was isolated and stored in 20 ordm;C for determination of the glucose level. Also, the rats' eyes were removed and their retial tissues separated quickly and stored in 70 ordm;C for gene expression evaluation and protein assay. To determine the gene expression level, RNA extraction, cDNA synthesis and realtime polymerase chain reaction were performed. The TGF beta;2 protein level was also measured by the ELISA kit.Results: The TGF beta;2 mRNA expression was increased 1.37 fold in diabetic rats compared to control rats and decreased 1.96 fold in garlictreated diabetic rats compared to untreated diabetic rats. The TGF beta;2 protein level was increased 3.08 fold in diabetic rats compared to control rats and decreased 2.56 fold in garlictreated diabetic rats compared to untreated diabetic rats.Conclusion: Garlic extract significantly decreased the TGF beta;2 level in retinal tissues of diabetic rats. The TGF beta;2 is an important factor in inflammation and damage to retinal; so, it is logical that garlic consumption can reduce diabetes complications by decreasing this factor.