بررسی آلودگی شیر خام به باکتری بروسلا با روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز

زمینه و هدف: تب مالت در بسیاری از کشورهای خاورمیانه مانند ایران یک مشکل مهم بهداشت عمومی محسوب می شود. در کشورهای در حال توسعه، آلودگی شیر به گونه های باکتری بروسلا اصلی ترین راه انتقال بیماری در انسان محسوب می شود. استاندارد طلایی تشخیص بروسلوز، جداسازی باکتری های گونه بروسلا می باشد، اما برای این منظور نیاز به تجهیزات با سطح ایمنی زیستی (biosafety level) سه و مهارت بالا و گذر زمان طولانی است. برای چیرگی بر این مشکلات از روش حساس و با اختصاصیت بالای واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) استفاده می شود. هدف از انجام این پژوهش ردیابی باکتری های گونه بروسلا در شیر تحویلی دامداری های اطراف شهر کرمان به یکی از کارخانه های مهم کرمان با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز است.روش بررسی: در این مطالعه مقطعی که از مهر تا اسفند 1394 انجام گرفت، از 48 گله گاو شیری مشتمل بر 4200 گاو که شیر خود را تحویل یکی از بزرگترین کارخانه های جنوب شرق ایران می دادند، نمونه های جداگانه تهیه گردید. اسید نوکلییک نمونه ها با روش بافر لیز کننده و پروتییناز k استخراج گردید سپس با استفاده از پرایمر جنس بروسلا، ژن is711 برای بودن اسید نوکلییک بروسلا در شیر با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز مورد بررسی قرار گرفت. در نمونه های مثبت قطعه ای به اندازه 317 جفت باز از ژنوم باکتری های گونه بروسلا تکثیر می یافت.یافته ها: چهار نمونه (3/%8) از مجموعه 48 نمونه شیر مخزن از 4200 گاو شیری از نظر وجود ژنوم باکتری های گونه بروسلا در شهر کرمان مثبت گردید.نتیجه گیری: نتایج گویای اندمیک بودن بروسلوز در گله های گاوی شیری در شهر کرمان می باشد.

Brucella contamination in raw milk by polymerase chain reaction

Background: Human brucellosis is a significant public health problem in many middle east countries including Iran. Brucella organisms, which are small aerobic, facultative intracellular coccobacilli, localize in the reproductive organs of host animals, causing abortions and sterility. They are shed in large numbers in the animal rsquo;s urine, milk, placental fluid, and other fluids. Dairy product from raw milk are a potential threat to public health in endemic developing countries. The gold standard for the diagnosis of brucellosis is isolation of Brucella species. However, isolation Brucella species is time consuming and needed to level 3 biocontainment facilities and highly skilled technical personnel to handle samples and live bacteria for eventual identification. Handling Brucella species increase risk of laboratory infection. Polymerase chain reaction (PCR) with high sensitivity and specifity overcomed to these disadvantages. The aim of this study was to detect Brucella species in milk from dairy cattle farms in Kerman province, Iran by PCR technique.Methods: Forty and eight bulk tank milk (BTM) were collected from October 2015 to March 2016 from 48 dairy cattle farm including 4200 cows. DNA of milk samples extracted by lysis buffer and proteinase K method. All milk samples were examined by PCR to detect Brucellaspecific DNA targeting IS 711. Positive samples must be showed 317 bp amplified, corresponding to the expected size of the IS 711 genome region in all Brucella species.Results: Using IS711 primer were detected in 4 samples (8.3%) Brucella spp. from 48 BTM samples in this area.Conclusion: The results indicate that brucellosis by Brucella species is endemic in the Kerman province dairy farms. Consumption of raw milk dairy products by individual farmers operating under poor hygienic conditions represents an high risk to public health. The need for implementing control measures and raising public awareness on zoonotic transmission of brucellosis are recommended. Vaccination of cattle is recommended for control of bovine brucellosis in enzootic areas with high prevalence rates.