بررسی بیان ژن Tsga10 در فرایند تمایز سلول‌های بنیادی جنینی موشی به سلول‌های ژرمینال در محیط آزمایشگاهی

زمینه و هدف: تولید سلول‌های ژرمینال در محیط آزمایشگاهی می‌تواند نوید‌دهنده درمان تعدادی از موارد ناباروری مردان باشد. مطالعه حاضر ضمن بررسی فرایند تمایز سلول‌های بنیادی جنینی موش به سلول‌های ژرمینال، بیان ژن testis specific 10 (tsga10) را نیز برای اولین‌بار در این فرایند مورد بررسی قرار داده است.روش بررسی: این مطالعه یک مطالعه آزمایشگاهی (in vitro) است که در گروه ژنتیک پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران از بهمن 1390 تا اسفند 1391 انجام شده است. سلول‌های بنیادی جنینی موشی توسط رتینوییک اسید (retinoic acid, ra) به سمت سلول‌های ژرمینال القا شدند. در نمونه سلول‌های در حال تمایز روزهای هفت، 12 و 25 بیان سه گروه از ژن‌های pre-meiotic، meiotic و post-meiotic با استفاده از reverse transcription polymerase chain reaction (rt-pcr) بررسی شد. برای بررسی بیان ژن tsga10 به‌عنوان یک ژن اختصاصی اسپرماتوژنز، real-time rt-pcr انجام گرفت و نتایج تفسیر گردید. حضور پروتیین tsga10 در سلول‌های تمایز‌یافته با وسترن بلاتینگ و ایمونوسایتوشیمی (immunocytochemistry) تایید شد.یافته‌ها: در مراحل اولیه روند تمایز (روز 12) میزان نسبی بیان tsga10 به 32/0 مقدار پایه آن در سلول‌های غیر تمایز‌یافته کاهش یافت. پس از بیان ژن‌های post-meiotic (روز 25) میزان نسبی بیان tsga10 به‌مقدار 2/2 افزایش یافت. همچنین میزان بیان نسبی tsga10 در بیضه موش پنج، 10 و 15 روزه به‌ترتیب 125، 150 و 170 بود. این میزان در بیضه موش بالغ برابر 1650 برآورد شد.نتیجه‌گیری: در طی فرایند تمایز سلول‌های بنیادی جنینی، بیان tsga10 پس از بیان ژن‌های post-meiotic نسبت به مرحله meiotic حدود 6/6 برابر افزایش داشت. افزایش بیان tsga10 در طی عبور از مرحله meiotic به post-meiotic، نقش این ژن و محصول پروتیین آن‌را در مراحل تکامل سلول‌های ژرمینال نشان می‌دهد.