بررسی نقش آگونیست و آنتاگونیست گیرنده آدرنرژیک بتا-2 در بیان ژن‌های اتصال شکافی(دو کانکسین 43/37) در سلول‌های کومولوس زنان با پاسخ ضعیف تخمدان

زمینه و هدف: کانکسن‌ها (connexin) پروتیین غشایی در ساختار اتصال شکافی یا گپ‌‌ جانکشن‌ها هستند که عهده‌دار انتقال یون‌ها و مولکول‌های پیام‌رسان به تخمک‌اند. هدف این مطالعه بررسی نقش گیرنده بتادو آدرنرژیک در روند رشد فولیکول براساس بیان ژن دو کانکسن (connexin)، 37 و 43 گپ‌ جانکشن‌هاست که نقش اولیه را در از سرگیری مجدد روند میوتیک و بلوغ اووسیت دارند.روش بررسی: این مطالعه موردیشاهدی از فروردین 98 تا آبان 1399 در مرکز تحقیقات بهداشت باروری بیمارستان امام خمینی تهران در دو گروه مطالعه (زنان با پاسخ ضعیف تخمدان) و کنترل (زنان اهدا‌کننده تخمک) انجام شد. هر گروه با معیار بولونیا (bologna) و ضوابط ورود اندکس توده بدنی زیر m2/kg 28 و محدوده سنی4520 سال و ضوابط خروج عدم مصرف دارو به‌جز تحریک‌کننده‌های تخمدان و عدم ابتلا به بیماری وارد مطالعه شدند. سیکل تحریک تخمک‌گذاری اجرا و کومولوس‌ها پس از پانکچر جدا و در محیط کشت سلولی قرار گرفتند. ایزوپروترنول (آگونیست) و پروپرانولول (آنتاگونیست) گیرنده بتادو با غلظتnm 100 به محیط اضافه و استخراج rna انجام و cdna سنتز گردید. بیان ژن توسط تکنیک realtime pcr تعیین شد.یافته‌ها: بیان ژن هر دو کانکسن (connexin) در گروه مطالعه بدون دارو (001/0p<)، پروپانولول (001/0p<) و ایزوپروترنول (001/0p<) نسبت به گروه کنترل تغییر معنادار داشت. ایزوپروترنول سبب کاهش و پروپانولول منجر به افزایش بیان ژن گردید (001/0p<).نتیجه‌گیری: این نتایج نشان داد که پاسخ ضعیف تخمدان با فعالیت گیرنده بتادو در تعامل معنادار است.

Evaluation role of beta-2 adrenoceptor agonist and antagonist in the expression of gap junction genes (connexin 37/43) in cumulus cells of women with poor ovarian response

Background: Connexon is a membrane structural protein in the gap junctions. These cellular connections are responsible for transporting ions and messenger molecules to the oocyte. This study aimed to investigate the role of beta2adrenoceptors in the process of follicle growth based on the expression of the two connexins 37/43 in the gap junctions that have a primary role in the mitotic resumption and oocyte maturation.Methods: This casecontrol study was conducted from April 2019 to November 2020 at the Reproductive Health Research Center of Tehran Imam Khomeini Hospital was performed on women with the poor ovarian response (POR) and control (women donate eggs) groups. Both groups had entry criteria with a body mass index under 28 m2/kg and 2045 years old. Exit criteria were including no drug use except ovarian stimulants and no illness. The diagnosis was made agreeing to the Bologna model criterion. Ovulation stimulation cycle was performed, and then after the puncture, cumulus cells were isolated by enzyme and were freezing in 80 centigrade until the time of inserting into the cell culture medium. Isoproterenol (agonist) and propranolol (antagonist) at a concentration of 100 nM were added to the culture medium as the beta2 adrenoceptors selective drugs. After culture, RNA extraction was performed and the concentration was read by Nanodrop, and then cDNA was synthesized. Gene expression was determined by realtime PCR.Results: The findings of connexin expression in the three study groups: without the drug (P<0.001), propranolol (P<0.001), and isoproterenol (P<0.001) were significant compared to the control group. Isoproterenol decreased expression but propranolol increased it (P<0.001).Conclusion: These findings confirm the important role of connexins 37 and 43 in cumulus cleft junctions that propranolol was able to increase its expression. Therefore, we suggest firstly these two connexins can be an effective target for oocyte growth and maturation. Secondly, propranolol could be a new treatment for women with POR and be effective in assisted reproductive technology (ART).