شناسایی گونه‌های کاندیدا با روش‌های قارچ‌شناسی و مولکولی در زنان باردار مبتلا به کاندیدیازیس واژینال

زمینه و هدف: ولوواژینیت کاندیدایی دوران بارداری می تواند با عوارضی همچون سقط جنین، پارگی زودرس کیسه آب، تولد نوزاد کم وزن، کوریوآمنیونیتیس و کاندیدیازیس سیستمیک مادرزادی مرتبط باشد. هدف از انجام این مطالعه شناسایی گونه های کاندیدا با روش های قارچ شناسی و مولکولی در زنان باردار مبتلا به کاندیدیازیس واژینال بود.روش بررسی: این مطالعه مقطعی بر روی 80 زن باردار مراجعه کننده به بیمارستان شهید نورانی طالش از فروردین تا آذر 1395 (هشت ماه) انجام پذیرفت. کشت روی کروم آگار کاندیدا به منظور جداسازی و افتراق گونه های مهم بالینی به عمل آمد. کشت ها به مدت 48 ساعت در c ° 35 انکوبه و کلنی های رشد یافته بر اساس رنگ و تعداد، شناسایی گردیدند. تایید نهایی گونه ها توسط روش polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (pcr-rflp) انجام پذیرفت.یافته ها: 20 مورد (25%) از بیماران مبتلا به واژینیت کاندیدایی بودند. از 22 ایزوله شناسایی شده توسط کشت، گونه های آلبیکنس به عنوان شایعترین گونه (72/8%)16، گلابراتا (22/7%)5 و کروزه ای (4/5%)1 شناسایی گردیدند. دو بیمار دارای عفونت توام (گونه های آلبیکنس و گلابراتا) بودند درحالی که با روش pcr-rflp، گونه های شناسایی شده به ترتیب شامل: آلبیکنس (59/1%)13، گلابراتا (22/7%)5، تروپیکالیس (13/6%)3 و کروزه ای (4/5%)1 مورد گزارش گردیدند. در این پژوهش از نظر آماری ارتباط معنادار بین کاندیدیازیس واژینال با علایم بالینی (p<0.001)، دیابت (p<0.014) و استفاده از آنتی بیوتیک ها (p<0.003) وجود داشت.نتیجه گیری: روش pcr-rflp به عنوان یک روش تکمیلی توانست گونه های کاندیدا را به درستی تعیین هویت نماید.

Identification of Candida species by molecular and mycological methods in pregnant women with vulvovaginal candidiasis

Background: Vaginal candidiasis is common in during pregnancy. It may lead to complications like abortions, premature birth, low birth weight, chorioamnionitis and fungal systemic neonatal infection. The aim of present study was identification of Candida species by mycological and molecular methods in pregnant women with vaginal candidiasis.Methods: This crosssectional study was performed on 80 pregnant women with or without clinical symptoms of vulvovaginal candidiasis referred to Shahid Noorani Talesh Hospital, Gilan University of Medical Sciences, Iran, from April to December 2015 (8 months). All specimens were examined by direct microscopy and culture on CHROMagar Candida medium for isolation and differentiation of major clinicalsignificant Candida species (spp.). Cultured media were incubated at 35 deg;C for 48 hours and evaluated based on color and number of grown colonies. If no growth was observed, the media were incubated for several additional days. Subcultures were done on Sabouraud dextrose agar (Merck, Germany) and Corn meal agar with Tween 80 media (Micromedia, Hungary) for further study. Identification of Candida spp. carried out by polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCRRFLP) method.Results: In this study, vulvovaginal candidiasis was observed in 20 (25%) patients. Twentytwo isolates were obtained from culture of specimens on CHROMagar Candida medium (Paris, France). The most common isolated species was Candida albicans 16 (72.8%) and followed by Candida glabrata 5 (22.7%), Candida tropicalis 3 (13.6%) and Candida krusei 1 (4.5%) cases. Two patients had mixed infection with 2 different Candida species (C. albicans and C. glabrata) While using PCRRFLP method, the Candida species were identified as 13 (59.1%) Candida albicans, 5 (22.7%) Candida glabra, 3 (13.6%) Candida tropicalis and 1 (4.5%) Candida krusei cases, respectively. In direct examination were seen yeast budding cells and pseudohyphae in 8 culture positive specimens. In the present study, results of conventional mycological method in differentiation of Candida spp. were consistent with molecular results in 80% of cases. There was also significant correlation between vulvovaginal candidiasis with clinical symptoms (P<0.0001), including diabetes mellitus (P<0.014), and taking antibacterial drugs (P<0.003) in pregnant women.Conclusion: PCRRFLP was able to identify correctly the Candida spp. as a complementary method.