بررسی پلی‌مورفیسم ژن spa در ایزوله‌های بالینی و ناقلین نازال استافیلوکوکوس اورئوس

زمینه و هدف: پروتیین a یک جزو اصلی در دیواره ی سلولی استافیلوکوکوس اورئوس است که آنالیز توالی نوکلئوتیدها در ناحیه x ژن spa کد کننده پروتیین a نشان داد این ناحیه از 24 جفت باز تکراری تشکیل شده که دارای پلی مورفیسم بالایی است. در این مطالعه الگوهای ژن spa استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از بینی پرسنل و نمونه های بالینی مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: در مجموع 200 نمونه بالینی از بیماران بستری و سواپ بینی از کارکنان بیمارستان های آموزشی دانشگاه علوم پزشکی همدان از مهر 1392تا مرداد 1393 جمع آوری گردید. بعد از تایید سویه های جدا شده، بررسی حساسیت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن با توجه به دستورکار clinical and laboratory standards institute (clsi) و شناسایی ژن meca سویه های methicillin-resistant staphylococcus aureus (mrsa) و spa (کد کننده پروتیین a) با روش pcr انجام شد. محصولات pcr با روش polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (pcrrflp) و آنزیم rsa i (afa i) برش خوردند. یافته ها: سویه ها mrsa به ترتیب بیشترین حساسیت و مقاومت را به کلیندامایسین و سیپروفلوکساسین داشتند. در مجموع هشت محصول pcr، با اندازه های مختلف برای ژن spa شناسایی شد که پس از برش آنزیمی 9 الگو به دست آمد که برخی از این الگوها در ایزوله های جدا شده از بینی پرسنل و نمونه های بالینی مشترک بودند. نتیجه گیری: الگوهای مشابه ژن spa در بیماران بستری و کارکنان بیانگر این مطلب است که یک منبع عفونت مشترک در چرخش و انتقال از فرد به فرد در بیمارستان است. تجزیه و تحلیل این الگوها می تواند انتقال عفونت در میان کارکنان و بیماران بستری در بیمارستان ها را کاهش داد و همچنین در درمان های دارویی می تواند به پزشکان و بیماران کمک کند.

Study of polymorphism spa gene (encoding protein A) of Staphylococcus aureus in clinical isolates and nasal carriers

Background: Staphylococcus aureus is the most important cause of nosocomial infections acquired in the community. Protein A is a major component of Staphylococcus aureus cell wall. In analysis of the nucleotide sequence Protein A encoding spa, locus x consists of 24 base pairs which repeat with high polymorphism. In this study, the spa gene of Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens were obtained from patients admitted to the hospital and healthy carriers. Methods: In a crosssectional study, a total of 200 samples were collected. One hundred fifty samples were obtained from hospitalized patients and 50 samples obtained from staff nasal swabs in Hamadan University Hospitals from October 2013 to August 2014. Disk diffusion antibiotic susceptibility tests performed. The antibiotics studied were Vancomycin (30 micro;g), Cefoxitin (15 micro;g) Gentamicin (10 micro;g), Tetracycline (30 micro;g), Trimethoprim/sulfamethoxazole (25 micro;g), Ciprofloxacin (5 micro;g), Erythromycin (15 micro;g), Clindamycin (2 micro;g), Rifampin (5 micro;g). The tests performed according to the guidelines of clinical and laboratory standards institute (CLSI). It also detect the mecA gene of Methicillinresistant Staphylococcus aureus strains (MRSA) and genes spa which encodes the protein A by polymerase chain reaction (PCR). The PCR products using a polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCRRFLP) method with enzyme Rsa I (Afa I) were prepared. Results: This methicillinresistant Staphylococcus aureus strain (MRSA) had the highest sensitivity and resistance to ciprofloxacin and clindamycin. Totally, 8 amplicon with different sizes for the spa gene were identified. A total of 9 patterns polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism (PCRRFLP) were found. Some of these patterns between Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens and nasal carriers were common. Conclusion: There is a similar pattern of spa gene among patients admitted to the hospital and staff, according to our findings. Analysis of the patterns can reduced transmission of infection in both hospital staff and patients. Also it can help the physicians for correct management of infections.