روشی ساده برای تخلیص ساب کلاس igg2a موشی با کمک کروماتوگرافی تعویض یونی و افینیتی کروماتوگرافی

زمینه: هدف از این مطالعه تخلیص ساب کلاس igg2a موش می باشد محصولی که برای ایمونیزاسیون حیوانات دیگر جهت تولید هیبریدوماها در پروسه تولید آنتی بادیهای مونو کلونال و تولید آنتی بادیهای پلی کلونال به کار می­رود. روش کار: در قدم نخست کروماتوگرافی تعویض یونی (ion exchange chromatography) برای تخلیص igg موش و در مرحله بعد افینیتی کروماتوگرافی با پروتئین proa) a) برای تخلیص ساب کلاس igg2a موش به کار برده شد. بعد از هر مرحله تخلیص روش الکتروفورز sds-page برای تایید خالص سازی به کار رفت. در مرحله آخر تایید ساب کلاس آنتی بادی خالص شده با کمک کیت تعیین ایزوتایپ صورت گرفت. یافته ها: رسوب ایمونوگلوبولین های موشی با غلظت mg/ml 27 به مقدار 3 سی سی روی ستون افینیتی کروماتوگرافی ion exchange برده شد. مقدار محصول igg از ستون تعویض یونی ion exchange) ) 28 میلی گرم و مقدار محصول igg2a ستون proa، 8 میلی گرم بود. در نتایج الکتروفورز sds-page در حالت احیا دو باند در موقعیت وزن مولکولی 25 و 50 کیلودالتون( kda) مشاهده شد. تعیین ایزوتایپ محصول به دست آمده وجود igg2a با زنجیره سبک کاپا را تایید کرد. نتیجه گیری: در این مطالعه محصول igg2a با خلوص بالای 95% به دست آمد. خلوص بالای محصول به دست آمده نشان می­دهد که کروماتوگرافی تعویض یونی و به دنبال آن کروماتوگرافی با proa روش مناسبی برای تخلیص ساب کلاسهای igg موش با کیفیت و خلوص بالا می­باشد. تولید این محصول مناسب و اقتصادی با درجه خلوص بالا قدمی به سوی اسقلال کشور است.