جداسازی و شناسایی باکتری های نمکدوست تولید کننده آنزیم های هیدرولایتیک جداسازی شده از مرکز ایران

زمینه: یکی از منابع مهم برای تولید آنزیم ها باکتری ها هستند. مطالعه اخیر با هدف جداسازی و غربالگری مولکولی باکتری های نمک دوست تولید کننده آنزیم های آمیلاز، لیپاز و پکتیناز از خاک شور مرکز ایران انجام گرفته است. روش کار: در این مطالعه از خاک شور حاج علی گول و بیارجمند استان سمنان نمونه برداری شد. جهت جداسازی باکتری های مولد آمیلاز، لیپاز و پکتیناز از محیط کشت اختصاصی هرکدام از آنزیم ها استفاده شد. فعالیت آنزیمی باکتری ها براساس تشکیل هاله شفاف یا ایجاد رسوب در اطراف کلنی ها پس از اضافه کردن معرف های مربوطه مشخص گردید. جدایه ها با فعالیت آنزیمی آمیلازی، لیپازی و پکتینازی با استفاده از روش تعیین توالی16s rrna شناسایی شدند. یافته ها: از هفت نمونه باکتری جدا شده از خاک، 4 باکتری با فعالیت آمیلاز، 6 باکتری با فعالیت لیپازی و 3 باکتری با فعالیت پکتینازی جداسازی و شناسایی گردیدند. از این بین دو جدایه، هر سه نوع آنزیم را تولید می کند که بررسی های مولکولی این دو جدایه متعلق به جنسbacillus است. از طرف دیگر باکتری های نمک دوست تولید کننده آنزیم های آمیلاز و پکتیناز متعلق به جنس های bacillus و halobacillus و باکتری های تولید کننده لیپاز متعلق به جنس های virgibacillus و bacillus بودند. نتیجه گیری: نتایج حاصل از پژوهش نشان داد که باکتری های باسیلوس جداشده از خاک قادر به تولید هر سه آنزیم آمیلاز، پکتیناز و لیپاز هستند.

Isolation and identification of hydrolytic enzymes generated by halophilic bacteria in center of Iran

Background: Bacteria are one of the important sources of producing enzymes. The aim of this study was to the isolate the halophilic bacteria producing amylase, lipase and pectinase from saline soil of the center of Iran. Methods: In this study, soil samples were collected from Dagh Biarjmand and Haj Aligholi in Semnan province. At first, isolated halophilic bacteria were cultured and screened for producing of hydrolytic enzymes including amylase, lipase and pectinase using enzymespecific media. The enzymatic activities of isolates were recognized by induction of growth inhibition zone and/or precipitation around colonies after addition of related indicators. Afterward, enzyme positive isolates were identifies using the 16S rRNA sequencing. Results: Out of 7 bacterial isolates, 4 bacteria with amylase activity, 6 bacteria with lipase activity and 3 bacteria with pectinase activity were recognized and identified. Results showed that 2 isolates with the ability of producing all three types of enzymes belong to Bacillus genus using molecular identification methods. Furthermore, the halophilic bacteria producing amylase and pectinase were belonging to Bacillus and Halobacillus genera. Besides, bacteria producing lipase belonged to Bacillus and Virgibacillus genera. Conclusion: The Bacillus bacteria isolated from the soil can produce all three amylase, pectinase and lipase enzymes.