کلونینگ و بیان ژن پرودی جیوسین استخراج‌شده از سراشیا مارسنس در باکتری ecoli xl1blue

زمینه و هدف سراشیا مارسنس باکتری‌های گرم منفی هستند. امروزه رنگدانه‌ زیستی پرودی جیوسین در تهیه و تولید محصولات دارویی به‌وفور مورد استفاده قرار گرفته است و به دلیل ویژگی‌های گزارش‌شده از فعالیت‌های ضد‌قارچی، سرکوب‌کننده‌های ایمنی بدن و ضدپرولیفراسیون، یک داروی امیدوارکننده محسوب می‌شود. با تولید این رنگیزه در مقیاس وسیع توسط روش‌های مبتنی بر کلونینگ، می‌توان به کاربرد آن در داروسازی با هزینه کم و در مقیاس صنعتی امیدوار بود. در مطالعه‌ حاضر کلونینگ ژن تولید‌کننده‌ پرودی جیوسین جدا‌شده از سراشیا مارسنس (pig) در باکتری اشرشیاکلی xl1blue انجام و بیان ژن کلون‌شده در میزبان تایید شد. همچنین خویشاوندان نزدیک باکتری مذکور جهت مطالعات آینده معرفی شدند.روش بررسی شصت نمونه از منابع بالینی بیمارستان‌های ساوه جداسازی شد. پس از تعیین هویت جدایه‌های سراشیا مارسنس، ژن pig این باکتری‌ها توسط روش کلونینگ ta با استفاده از وکتور ptg19 در درون میزبان اشرشیاکلی xl1blue کلون شد. بیان ژن کلون‌شده در کلونی‌های نوترکیب توسط روش real time pcr بررسی شد. با استفاده از نرم‌افزارهای clustalx و  mega 5درخت فیلوژنی رسم شد. یافته‌ها دوازده ایزوله‌ سراشیا مارسنس شناسایی شد که از بین آن‌ها چهار ایزوله، ژن pig را دارا بودند. بیان ژن pig در escherichia coli xl1blue نوترکیب تولید‌شده، قابل ردیابی بود و اثبات شد. برخی خویشاوندان نزدیک سراشیا شناسایی شدند تا در مطالعات آینده کاندیدای بررسی قرار گیرد.نتیجه‌گیری سراشیا مارسنس می‌تواند منبعی غنی از رنگدانه‌ها و ردهای بومی به منظور تولید پرودی جیوسین باشد

Cloning and Expression of Serratia Marcescens Prodigiosin Gene in Ecoli XL1blue

Background and Objectives: Serratia is a gramnegative bacterium. The pigmentation property of Serratia Marcescens is used as a marker of dust particles in the environment and in the hospital. Today biopigments are also widely used in the manufacture and production of pharmaceutical products. Prodigiosin is a promising drug due to its reported properties of antifungal immunosuppressive and antiproliferative activities. In the present study, cloning of pig gene isolated from Serratia Marcescens in Ecoli XL1blue was performed.Subjects and Methods 60 Samples were taken from clinical sources of patients hospitalized with urinary tract infections in Saveh Hospitals. Serratia Marcescens were identified and isolated by different tests. The pig gene was cloned by TA cloning using PTG19 vector into the Escherichia coli XL1blue as host. Expression of cloned gene in recombinant colonies was evaluated by Real time PCR. The phylogenetic tree was plotted using clustalX and Mega5 softwareResults Screening of samples identified 12 isolates of Serratia Marcescens from then 4 isolates had pig gene. Expression of Pig gene in Escherichia coli XL1blue was confirmed by RealTima PCR. As a result of phylogenetic studies, some close relatives of serratia have been identified as candidates for further studiesConclusion Serratia Marcescens can be considered as a rich source of pigments with many applications and can be used as indigenous strains to produce Prodigiosin.