جداسازی مولکولی و همسانه سازی ژن انتقالی پس زننده (efflux) کاست ژنومی (abc) از تریکوفایتون روبروم

زمینه و هدف: خانواده abc ترانسپورترها در قارچ ها علاوه بر ایفای نقش در تقسیم سلولی و نگهداری حجم سلول در خروج متابولیت های طبیعی و مقاومت دارویی، نیز نقش مهمی دارد. هدف از انجام این تحقیق جداسازی مولکولی و همسانه سازی ژن انتقالی پس زننده (efflux) کاست ژنومی (abc) تریکوفایتون روبروم خواهد بود. روش بررسی: در این مطالعه 60 نمونه درماتوفیتوزیس از بیماران جداسازی و با روشهای میکروسکوپی ، شیمیایی و مولکولی تایید گردیدند. پس از تایید تریکوفیتون در مرحله بعدی آزمون pcr با استفاده از پرایمرهای اختصاصی مربوط به کاست ژنی abc صورت گرفت. قطعه ژنی abc در وکتور ptg19 کلون و تایید گردید. بیان کاست ژنومیabc با روش real-time pcr سنجیده شد. یافته ها : از 60 نمونه جداسازی شده در مجموع 12 ایزوله تریکوفیتون روبروم جداسازی شد. از 12سویه تریکوفایتون جدا شده، 6 سویه حامل ژن abc بودند.توسط آزمون pcr colony حضور ژن مورد نظر تایید و در نهایت بیان و تکثیر ژن abc کلون شده در باکتری اشریشیاکلی از طریق real time pcr تایید شد. نتیجه گیری: یکی از پایدار ترین راه های مقاومت به آنتی بیوتیک ها در میکروارگانیسم بیان افلوکس پمپ ها می باشد. در این راستا محققان ترکیبات مهارکننده افلوکس پمپ ها را تولید کردند و از ترکیب آن ها با آنتی بیوتیک ها در درمان عفونت ها استفاده می کنند؛ اما به دلیل سمیت اکثر این ترکیبات در انسان استفاده گسترده از آن ها ممنوع می باشد از این رو چالش جدید،یافتن ترکیبات مهارکننده جدید با سمیت کمتر است .

Molecular separation and cloning of the ATPbinding Cassette (ABC) from Trichophyton Rubru

Background and Objectives: The ABC family of transporters, in addition to their role in cell division and storage of cell volume in fungi, they are reported to play a role in natural metabolism and drug resistance. The purpose of this study is to investigate the molecular separation and cloning of the ATPbinding Cassette (ABC) from Trichophyton rubrum. Methods: Sixty samples of dermatophytosis were isolated from the patients. Isolates were identified by chemical and molecular tests. Afterward, PCR was performed using specific primers for the ABC gene. PCR product was cloned in the PTG19 vector. RealTime PCR was performed to evaluate the expression level of ABC gene. Results: A total of 12 isolates of Trichophyton Rubrum were identified. Six isolates were positive for ABC gene. The expression of the ABC gene cloned in E. coli XL1blue was confirmed by Real time PCR. Conclusion: Expression of efflux pumps considered a way of resistance to antibiotics in microorganisms. In this regard, the researchers have developed the efflux pump inhibitor compounds and used them in combination with antibiotics to combat infections. However, because of the toxicity of most of these compounds in humans, their extensive use is prohibited. Therefore, finding new inhibitory compounds with little or no toxicity is challenging.