>
Fa   |   Ar   |   En
   تعیین کمی آنتی ژن پرتوزیس توکسین همراه و آزاد سلولی بمنظور تعیین زمان مناسب برداشت با استفاده از الیزا  
   
نویسنده نوفلی مجتبی ,هلالی نسب مژگان ,محمدباقر داود
منبع مجله علمي پزشكي جندي شاپور - 1398 - دوره : 18 - شماره : 2 - صفحه:193 -203
چکیده    زمینه و هدف: طول دوره کشت فرمانتوری واکسن سیاه سرفه سلولی ( wcp whole cell pertussis)، برکمیت و کیفیت پرتوزیس توکسین (pertussis toxinptx) تولید شده این باکتری اثر گذاشته و از این طریق تاثیر به سزایی در ایمینوژنیسیتی واکسن تولیدی دارد. هدف از این تحقیق اندازه گیری میزان ptx آزاد و متصل به باکتری بوردتلا پرتوزیس با روش الایزا، جهت تعیین زمان مناسب برداشت کشت فرمانتوری بوردتلا پرتوزیس به منظور تعیین شرایط بهینه تولید واکسنwcp بود. روش بررسی: میزان آنتی ژن ptx در سه سری ساخت کشت های فرمانتوری واکسن wcp سویه 509 (a،b و c) در محیط کشت b2 و در جذب های نوری 0.1، 0.8 ، 1.1، 1.2 ،1.3 اندازه گیری گردید. هر نمونه در سه حالت رسوب، محلول رویی و سوسپانسیون واکسنwcp در مقایسه با آنتی ژن پرتوزیس توکسین استاندارد با روش elisa و نرم افزارexcel کمیت سنجی و مقایسه گردید. یافته ها: بر اساس آنالیز نتایج حاصل که بر مبنای تعیین حداکثر میزان آنتی ژن ptx تفسیر شده است، مدت زمان بهینه کشت فرمانتوری 350 لیتریnovopaljas موسسه رازی برای سویه 509 ،41 ساعت با حداکثرجذب نوری 1.2 تعیین گردید. نتیجه گیری: معایب فراوان روش کدورت سنجی و مزایای بسیار (کمی، کیفی و تکرار پذیری) اندازه گیری آنتی ژن ptx با روش الایزا، نوید بخش ارایه روشی مطمئن به منظور کنترل پارامتر های موثر در فرآیند تولید، کنترل حین تولید (ipqcin process quality control) و تولید بهینه و پایدار (consistency approach) واکسن wcp می باشد.
کلیدواژه واکسن سیاه سرفه سلولی، آنتی ژن Ptx، کشت فرمانتوری سیاه سرفه، الایزا
آدرس موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی, بخش تحقیق و تولید واکسن های باکتریایی پزشکی, ایران, دانشگاه آزاد اسلامی واحد رشت, دانشکده علوم, ایران, موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی, ایران
 
   Free and Cell Associated Pertussis Toxin Antigen Quantification to Determine Bordetella Pertussis Appropriate Harvesting Time by ELISA Method  
   
Authors Mohammadbagher Davoud ,Noofeli Mojtaba ,Helalinasab Mozhgan
Abstract    Background and Objectives: Duration of whole cell pertussis (WCP) fermenter culture affects the quality and quantity of the Bordetella pertussis PTX production which directly influence in pertussis vaccine potency, and in this way, has a significant consequence on vaccine immunogenicity. The aim of this research was to quantify the cell associated and free pertussis toxin antigen by ELISA method to determine the optimal and appropriate harvesting time for WCP vaccine production. Material and Methods: The PTX antigen levels were measured in three series of fermenter (350 L) batches (A, B and C) of WCP vaccine strain 509, cultivated in culture media B2 in optical densities of 0.1, 0.8, 1.1, 1.2, 1.3. Each sample was quantitatively evaluated in three modes of sediment, supernatant and suspension of WCP vaccine compared to standard pertussis toxin by ELISA and analyzed using Excel software. Results: According to the analysis of the results which was interpreted based on maximum amount of the PTX antigen anchor to Bordetella pertussis, optimal duration of the fermenter (350 L) culture of WCP strain 509, was determined for 38 to 42 hours at optical density of 1.2. Conclusion: Due to the disadvantages of turbidity method and the advantages of PTX antigen measurement by ELISA method (quantitative, qualitative and repeatability), this approach promises a reliable method in order to effective control of parameters and procedures in production process, in process quality control (IPQC) and consistency approach of WCP vaccine production.
Keywords
 
 

Copyright 2023
Islamic World Science Citation Center
All Rights Reserved