تولید آنتی بادی تک زنجیره‌ای انسانی شده ضد مارکر CD20 در E.coli

زمینه و هدف: رتوکسی‌مب (rituximab) آنتی‌بادی مونوکلونال کایمریک بر ضد آنتی ژن cd20 بوده، به‌طور گسترده برای درمان لنفومای سلول‌های b استفاده می‌گردد. با این وجود سایز بزرگ و ایمنی‌زایی آنتی‌بادی‌های کامل موشی همواره به عنوان مشکل در ایمونوتراپی مطرح بوده است. جهت حل این مشکل می‌توان از قطعات کوچک آنتی‌بادی انسانی شده استفاده نمود. هدف از این تحقیق تولید آنتی‌بادی تک زنجیره‌ای انسانی به منظور کاربرد آن در درمان ناهنجاری‌های مرتبط با سلول‌ b است. روش بررسی: به منظور طراحی آنتی‌بادی rituximab انسانی شده با استفاده از روش cdr-grafting، نواحی cdr موشی به قسمت‌های framework ایمونوگلوبولین‌های germline انسانی منتخب دارای بیشترین شباهت با همتای موشی منتقل شدند. توالی نوکلیوتیدی طراحی شده درe.coli بیان شده، سپس تخلیص گردید. میزان بیان آنتی‌بادی نوترکیب با روش sds-page و واکنش آن با رده‌ی سلولی raji با استفاده از تکنیک dot blot مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: در انتخاب نواحی framework انسانی به‌منظور انجام cdr grafting ایمونوگلوبولین‌های ighv1-46*03و igkv1-39*01 بیشترین شباهت را با آنتی بادی اولیه نشان دادند. بررسی بیان با روش sds-page مشخص کرد آنتی بادی تولیدی با غلظت بالا در e.coli بیان گردیده، با افینیتی مناسب نسبت به آنتی ژن cd20 بیان شده در سطح سلول‌های raji واکنش نشان داد.نتیجه‌گیری: آنتی‌بادی تک زنجیره‌ای انسانی تولید شده می‌تواند به مارکر cd20 متصل گردیده، به‌عنوان روش درمانی برای هدف قرار دادن این آنتی ژن در درمان سرطان‌های مرتبط به کار رود.واژگان کلیدی: انسانی کردن، آنتی‌بادی تک زنجیره‌ای، cd20