|
|
تشخیص همزمان سه باکتری سالمونلا تیفی، باسیلوس آنتراسیس و یرسینیا پستیس با راه اندازی مولتی پلکس پیسیآر
|
|
|
|
|
نویسنده
|
صفری فروشانی نرگس ,کرمی علی ,پورعلی فاطمه ,عیدی اکرم
|
منبع
|
journal of advances in medical and biomedical research - 1392 - دوره : 21 - شماره : 85 - صفحه:84 -98
|
چکیده
|
زمینه و هدف: سه باکتری سالمونلا تیفی، باسیلوس آنتراسیس و یرسینیا پستیس از پاتوژنهای واقعی برای انسان محسوب میشوند و تشخیص بهموقع و زود هنگام آنها حایز اهمیت بسیاری است. سالمونلا تیفی باعث بیماری حصبه، باسیلوس آنتراسیس باعث سیاه زخم و یرسینیا پستیس سبب بیماری طاعون میشود. این سه نوع باکتری بهعنوان عوامل بیولوژیک نظامی نیز استفاده میگردد. روشهای کلاسیک تشخیص این باکتریها طولانی و پیچیده است. مطالعهی حاضر ارایهی یک روش تشخیصی مولکولی جدید و سریع برای تشخیص همزمان این سه باکتری در یک واکنش مولتی پلکس پیسیآر میباشد.روش بررسی: واکنش زنجیره ایی پلی مراز polymerase chain reaction, pcr) ) برروی ژنهای ویرولانس inva,hp سالمونلا تیفی،pa,chr باسیلوس آنتراسیس و pla یرسینیا پستیس به صورت یونی پلکس و مولتی پلکس پی سی آر طراحی و انجام شد. dnaژنومی از سایر باکتریها جهت بررسی ویژگی پرایمر و آزمایش pcr استفاده شد. جهت بررسی حساسیت واکنش از دو روش شمارش کلنی و رقت ژنوم استفاده شد.یافتهها: بررسی این روش با سویههای استاندارد مشخص نمود که پرایمرها اختصاصی است و محصولات با اندازهی مورد نظر تولید گردید. بررسی حساسیت روش نشان داد که این روش قادر است 1 تا10 کپی ژنوم و یا 1 تا 10 واحد کلنی برای هر کدام از این باکتریها بهطور اختصاصی تشخیص دهد. برای تایید محصولات ایجاد شده در pcr تمام قطعات بهجز محصول bp1083 باسیل آنتراکس تعیین ترادف شدند و آنتراکس با پرایمر 125 برش آنزیمی تایید گردید.نتیجهگیری: براساس این مطالعه روش طراحی شده ابزاری دقیق، سریع و کم هزینه برای جستجو و تشخیص این باکتریها از سایر باکتریهای همخانواده و تشخیص سریع این سه عامل در نمونههای مختلف و جستجو و تشخیص این باکتریها را در موارد بیوتروریستی فراهم میکند.واژگان کلیدی: تشخیص، باسیلوس آنتراسیس، سالمونلا تیفی، یرسینیا پستیس، مولتی پلکس پیسیآر.
|
کلیدواژه
|
تشخیص ,باسیلوس آنتراسیس ,سالمونلا تیفی ,یرسینیا پستیس ,مولتی پلکس پیسیآر ,Detection ,Salmonella typhi ,Bacillus antheracis ,Yersinia pestis ,Multiplex PCR
|
آدرس
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|