|
|
بررسی ارتباط بین کمبود پروتامین و آزاد شدن قطعات DNA از اسپرمهای نگهداری شده در محیط مصرفی Ham’s F10
|
|
|
|
|
نویسنده
|
صالحی محمد ,قلیزاده مژده ,نعمت الهی صدیقه ,بندهپور مزگان ,کاظمی دمنه بهرام ,حسینی احمد
|
منبع
|
journal of advances in medical and biomedical research - 1392 - دوره : 21 - شماره : 85 - صفحه:21 -30
|
چکیده
|
زمینه و هدف: کمبود پروتامین و آسیب dna بر میزان بیان ژنها در دورهی جنینی اثر مهمی دارد. نگهداری اسپرم در محیط کشت موجب تغییرات مورفولوژیک هسته و آزاد شدن dna میگردد. با وجود این، ارتباط بین کمبود پروتامین و میزان آزاد سازی قطعات dna از اسپرمهای نگهداری شده در محیط کشت و حضور ژن dnmt1 در این قطعات مشخص نمیباشد.روش بررسی: آنالیز مایع سیمن طبق معیار who انجام شد. جهت تعیین کمبود پروتامین از رنگآمیزی cma3 استفاده گردید. 20 میلیون اسپرم از هر نمونه در محیط مصرفی ham’s f10 به مدت 24 ساعت در دمای 37 درجهی سانتیگراد انکوبه شد. پس از سانتریفوژ کردن، از فاز سوپرناتانت استخراج dna صورت گرفت. غلظت dna توسط بیوفوتومتر تعیین گردید. حضور ژن dnmt1 توسط انجام pcr با پرایمرهای اختصاصی و الکتروفورز محصولات pcr بر روی ژل آگارز تایید شد. یافتهها: بین میزان قطعات dna آزاد شده از اسپرم در محیط کشت و رنگ آمیزی cma3 ارتباط مستقیم و معنیداری مشاهده گردید (05/0p < ). بین میزان قطعات dna آزاد شده از اسپرم در محیط کشت و حضور ژن dnmt1 ارتباط مستقیم و معنیداری وجود دارد (05/0p < ). ارتباط معنیداری بین کمبود پروتامین و حضور ژن dnmt1 در قطعات آزاد شده از اسپرم مشاهده نشد. نتیجه گیری: مطالعهی حاضر بیانگر این امر است که انکوباسیون اسپرمهای دارای کمبود پروتامین منجر به آزاد شدن قطعات بیشتری از dna اسپرم میگردد که در نهایت سلامت جنینهای حاصل از این اسپرمها را تحت تاثیر قرار میدهد.واژگان کلیدی: پروتامین، کروماتین اسپرم، قطعات dna
|
کلیدواژه
|
پروتامین ,کروماتین اسپرم ,قطعات DNA ,Protamine ,Sperm chromatin ,DNA fragments
|
آدرس
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|