مقایسه‌ی چهار نوع مختلف حامل برای رشد سلول Vero و تکثیر ویروس هاری برای تولید واکسن هاری انسانی

زمینه و هدف: در این مطالعه توانایی سلول vero برای رشد روی فیبراسل دیسک، و سه نوع ریز حامل(microcarrier) شاملسیتودکس-1 و سیتودکس-3 و سیگما سولوهیل در فلاسک‌های همزن دار با حجم 500 میلی‌لیتر حاوی محیط کشت سرم دار fetal calf serum (fcs))10% (dmem+ و محیط کشت بدون سرم (vp-sfm) مورد مقایسه قرار گرفت. سپس تکثیر سویه‌ی فیکس ویروس هاری pv (pasteur virus) در سلول‌های رشد یافته در شرایط فوق به منظور تولید واکسن هاری بررسی و مقایسه شد.روش بررسی: در فاز رشد از سامانه‌ی تعویض گامی محیط کشت (stepwise perfusion) استفاده شد و فاز تولید ویروس در سامانه‌ی ثابت (batch) با استفاده از bovine serum (bsa) albumin2/0%+ 199 mبه‌عنوان محیط سرم دار و vp-sfm به عنوان محیط فاقد سرم انجام شد. مقدار ریز حامل استفاده شده بر حسب سطح (سانتی‌متر مربع) و تعداد سلول اولیه‌ی تلقیح شده به محیط کشت در آزمایش‌ها یکسان و به ترتیب برابر cm212000 و cells/cm2 12500تعیین گردید. یافته‌ها: بیشترین تعداد سلول با استفاده از فیبراسل دیسک در محیط کشت dmem برابر با cells/cm 106*7/0±1/7 در روز نهم به‌دست آمد در حالی‌که کمترین تعداد سلول با استفاده از سیتودکس-3 در محیط کشت vp-sfm برابر با cells/cm106*2/0±91/2 حاصل شد. بیشترین تیتر ویروس هاری برابر با fluorescent focus unit (ffu)/ml 106*4/4±18/55 در محیط کشت vp-sfm حاوی فیبراسل دیسک و کمترین تیتر در محیط m199 حاوی سیتودکس-3 برابر ffu/ml 106*4/0±66/3 حاصل شد.نتیجه‌گیری: در مجموع آزمایش‌ها فیبراسل دیسک بهتر از انواع ریز حامل رشد سلول‌ها را حمایت کرد و استفاده از dmem برای رشد سلول و استفاده از vp-sfm برای تولید ویروس نتایج بهتری را نشان داد. واکسن تجربی تهیه شده با ویروس‌های جمع‌آوری شده از vp-sfm ایمنی‌زایی (potency) قابل قبول معادل iu75/2 داشت. با توجه به نتایج این تحقیق و امکان تولید و روش ساده استفاده از فیبراسل دیسک، این حامل برای کشت سلول vero و به منظور تکثیر ویروس هاری توصیه می‌گردد.