استاندارد سازی روش تشخیص مولکولی ent D استافیلوکوکوس آریوس جدا شده از عفونت‌های انسانی و تعیین سکانس آن

زمینه و هدف: انتروتوکسین d استافیلوکوکوس به عنوان یک سوپر آنتی‌ژن توسط نمونه‌های عفونی منابع انسانی و حیوانی تولید می‌گردد. هدف این تحقیق استاندارد سازی روش تشخیص استافیلوکوکوس تولید کننده‌ی انتروتوکسین d ‌بود. روش‌ بررسی: روش pcr جهت تشخیصent d در استافیلوکوکوس آریوس‌های جدا شده از نمونه‌های انسانی (310 سویه جدا شده)set up گردید. محصول pcr خالص سازی و تعیین سکانس شد. سکانس حاصل blast گردید. همچنین، توانایی تولید انتروتوکسینd تمام سویه‌های ناقل ent d نیز با کیت الیزا بررسی شدند. یافته‌ها: نتایج نشان داد، روش مولکولی pcr به خوبی set up شده است. زیرا، در یک مرحله پرایمرهای مورد استفاده دو باند تکثیر شدند، یکی در محدوده‌ی bp 1400 و دیگری در محدود‌ه‌ی bp 700 بود. هر دو باند از روی ژل جدا و تعیین سکانس شدند. مقایسه‌ی سکانس حاصل از باند bp 700 با سکانس ژن استاندارد موجود در بانک ژن انطباق 99 درصد را نشان داد. نتایج حاکی از آن بود که ent d در محصول bp 700 قرار داشت. چنان‌که multiple alignment سکانس حاصل با سکانس ژن استاندارد مقایسه و تایید گردید. توکسین‌زایی سویه‌های ناقل ent d با آزمون الیزا تایید گردید. نتیجه‌گیری: بر اساس اطلاعات موجود، در حال حاضر سویه‌های استافیلوکوکوس آریوس کواگولاز مثبت در نمونه‌های بالینی مورد توجه قرار می‌گیرند. اما روشی جهت نشان دادن توانایی تولید انتروتوکسین‌ها از جمله انتروتوکسین d وجود ندارد. تحقیق حاضر روشی ساده و سریع جهت تایید توانایی توکسین‌زایی باکتری را ارایه و تشخیص سویه‌های تولید کننده‌ی انتروتوکسین d را استاندارد سازی نموده است.