ارتباط بیان فاکتور رونویسی pou5f1 با افزایش سن به عنوان یک عامل اپی‌ژنتیکی

مقدمه: هدف از مطالعه‌ی حاضر، بررسی ارتباط میزان بیان فاکتور مهم رونویسی pou5f1 در سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی با سن و ارائه‌ی الگوهای بیانی این فاکتور در لوله‌ی اسپرم‌ساز موش می‌باشد.روش‌ها: در مطالعه‌ی حاضر پس از استخراج بیضه‌ی موش‌های نوزاد دو هفته‌ای و بالغ 16 هفته‌ای که از موسسه‌ی پاستور ایران خریداری شد، سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی جدا‌سازی گردید؛ پس از کشت سلول‌ها در محیط کشت stempro-34 medium حاوی فاکتورهای رشد اختصاصی کشت داده شدند. همینطور بافت برش داده شده پس از انجام مراحل فیکس کردن و آماده‌سازی، با آنتی‌بادی‌های اولیه و ثانویه انکوبه شدند و بررسی ایمنوهیستوشیمیایی با میکروسکوپ کونفوکال انجام گردید. همچنین آنالیزreal-time pcr برای بررسی کمی میزان بیان فاکتور رونویسی pou5f1 استفاده شد.یافته‌ها: در حالی که در آنالیز ایمنوهیستوشیمیایی، بیان بالای فاکتور رونویسی pou5f1در بیضه‌ی نوزاد مشاهده شد، تعداد سلول‌های pou5f1 مثبت در لوله‌های اسپرم‌ساز بیضه‌ی بالغ بیشتر از نوزاد بود. همینطور تجزیه و تحلیل real-time pcr نشان داد که میزان بیان ژن pou5f1 در ssc‌های نوزاد به طور معنی‌داری (0/05>p) بالاتر از ‌sscهای 16 هفته‌ای بود.نتیجه‌گیری: نتایج حاصل می‌تواند پایه ابعاد جدیدی در ارتباط فاکتورهای اپی‌ژنتیکی با قدرت تمایزی سلول‌های بنیادی را آشکار سازد که باید در پژوهش‌های تمایز آزمایشگاهی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی به سلول‌های اسپرم مورد توجه قرار گیرد.

the relationship between pou5f1 transcription factor expression and age increasing as an epigenetic factor

background: the purpose of this study is to investigate the relationship between the expression level of the important transcription factor pou5f1 in spermatogonial stem cells with age and to present the expression patterns of this factor in the mouse spermatogenic tube.methods: in the present study, spermatogonial stem cells were isolated after extracting the testicles of two-week-old and sixteen-week-old adult mice purchased from the pasteur institute of iran. the cells were cultured in a stempro-34 medium containing specific growth factors. also, after fixing and preparing the tissue, they were incubated with primary and secondary antibodies, and an immunohistochemical examination was done with a confocal microscope. then, real-time pcr analysis was used to quantitatively investigate the expression of the pou5f1 transcription factor.findings: while in the immunohistochemical analysis, high expression of the pou5f1 transcription factor was observed in the infant’s testis, the number of pou5f1 positive cells in the seminiferous tubules of the adult testis was higher than that of the infant. also, real-time pcr analysis showed that the level of pou5f1 gene expression in newborn sscs was significantly (p < 0.05) higher than 16-week-old sscs.conclusion: the results can reveal the foundation of new dimensions in the relationship between epigenetic factors and the differentiation power of stem cells, which should be considered in research on the differentiation of spermatogonial stem cells into sperm cells.