اثرات ضدمیکروبی فیوژن پپتید tp4-lyc1 بر سویه‌های آسینتوباکتر بومانی مقاوم به چند دارو

مقدمه: کلیستین، تایگسایکلین و آمپی‌سیلین/سولباکتام با دوز بالا تنها آنتی‌بیوتیک‌هایی هستند که اثربخشی بالایی در برابر acinetobacter baumannii مقاوم به چند دارو داشته و آخرین خط درمان آن هستند. بنابراین، بررسی عوامل ضدمیکروبی جدید با فعالیت بالقوه علیه این پاتوژن ضروری می‌باشد. هدف این پژوهش، تولید یک فیوژن پپتید تشکیل شده از دو پپتید ضدمیکروبی شامل (tilapia piscidin 4) tp4 و لیکوزین-1 (lyc1) و ارزیابی فعالیت ضدمیکروبی آن در برابر آسینتوباکتر بومانی مقاوم و همچنین ارزیابی اثرات همزمان این پپتید با کلیستین و مروپنم بر روی a. baumannii مقاوم به چند دارو می‌باشد.روش‌ها: بهینه‌سازی شرایط برش هر پپتید به منظور کسب بیشترین پپتیدهای جدا شده از تگ اینتئینی در وکتور ptwin-1 بر اساس زمان انکوباسیون و ph بافر برش انجام شد و اثرات ضدمیکروبی هر پپتید، به تنهایی یا در ترکیب با کلیستین یا مروپنم به ترتیب با روش‌های میکرودیلوشن براث و تخته شطرنجی، بررسی گردید.یافته‌ها: بهترین شرایط برای برش tp4 استفاده از بافر b2 با ph = 6.5 برای 24 ساعت زمان انکوباسیون بود. این شرایط برای lyc1 و tp4-lyc1 به ترتیب ph = 4 برای 24 و 48 ساعت زمان انکوباسیون به دست آمد. فعالیت ضدباکتریایی tp4-lyc1 بیش از tp4 برای هر نمونه‌ی بیولوژیکی بود. همچنین tp4-lyc1 در اکثر موارد دارای اثرات سینرژیست با مروپنم و کلیستین بود.نتیجه‌گیری: tp4-lyc1 این پتانسیل را دارد که به عنوان یک کاندید برای درمان عفونت‌های ناشی از a. baumanni در ترکیب با آنتی‌بیوتیک‌های موثر معمول به منظور کاهش دوز این آنتی‌بیوتیک‌ها و همچنین جلوگیری از بروز مقاومت آنتی‌بیوتیکی ناخواسته استفاده شود.

the antimicrobial effects of tp4-lyc1 fusion protein against multidrug-resistant a. baumannii

background: colistin, tigecycline and ampicillin/sulbactam (high dose) are the only antibiotics with high efficacy against acinetobacter baumannii making them the last line of treatment. so, the investigation of new antimicrobial agents with potential activity against these pathogens is crucial. antimicrobial peptides are natural agents that play an important role in innate immunity against various types of pathogens. in this project, the antimicrobial activity of tp4-lyc1, an antimicrobial peptide consisting of tilapia piscidin 4 (tp4) with lycosin-1, was investigated against resistant a. baumannii as well as the synergistic effects of this chimeric peptide with colistin and meropenem.methods: optimization of the cleavage process for each peptides (tp4, lyc1, and tp4-lyc1) to obtain the maximum amount of peptides was performed based on the incubation temperature, time of incubation and the cleavage buffer ph. finally, the antimicrobial effects of each peptide, alone or in combination with colistin or meropenem were analyzed by broth micro-dillusion and checker board methods, respectively.findings: the best conditions for cleaving tp4, were ph 6.5 with a 24 hours incubation time. these conditions for lyc1 and the chimeric peptide were concluded as ph 4 with incubation time of 24 and 48 hours, respectively. the antibacterial activity of tp4 was lower than tp4-lyc1 for each biological sample. also, tp4-lyc1 exhibited synergistic effects with meropenem and colistin in most cases.conclusion: tp4-lyc1 shows potential as a candidate for the treatment of infections caused by a. baumanni in combination with routine effective antibiotics in order to reduce the dosage of these antibiotics.