بیان پذیرنده‌های nkg2d در سطح لنفوسیت‌های cd3+ و cd56+ در نمونه خون بیماران پره‌اکلامپسی و تاثیر سیلیمارین بر فعالیت این سلول‌ها در محیط کشت

مقدمه: افزایش تعداد و عملکرد سلول‌های nk و سایتوکاین‌ها در آندومتریوم و خون محیطی زنان مبتلا به پره‌اکلامپسی گزارش گردیده است. nkg2d، یکی از پذیرنده‌های سطح سلولی به عنوان شاخص فعالیت به ویژه در nk و سایر لنفوسیت‌ها شناخته شده است. سیلیمارین از فلاونوئیدهای گیاهی است که به عنوان عامل تعدیل ایمنی با تاثیر مهاری بر سلول‌های nk روند و شدت بیماری را کاهش دهد. در این مطالعه، تاثیر محلول سیلیمارین بر عوامل ایمنی‌شناسی موثر در پره‌اکلامپسی در محیط کشت سلولی مورد بررسی قرار گرفت.روش‌ها: نمونه‌ها از خون بیماران پره اکلامپسی و باردار و غیرباردار سلامت با جداسازی لنفوسیت‌ها به روش گرادیان غلظت با فایکول و استفاده از روش فلوسیتومتری میزان بیان nkg2d در سطح سلول‌های cd56+ cd3 و cd3+ بررسی شد. همچنین، از غلظت‌های متفاوت سیلیمارین در محیط کشت سلولی و بررسی میزان بیان nkg2d در لنفوسیت‌ها و میزان تولید ifnγ در محیط کشت سلولی با روش الیزا ارزیابی گردید.یافته‌ها: در گروه پره‌اکلامپسی، فراوانی لنفوسیت‌های cd3 cd56+ و نیز بیان nkg2d در سطح لنفوسیت‌هایcd56+  افزایش داشت. در حالی که، میزان بیانnkg2d  لنفوسیت‌ها در محیط کشت در گروه پره‌اکلامپسی تحت‌ تاثیر سیلیمارین، کاهش یافت. سیلیمارین در محیط کشت سلول‌هایpbmcs ، ‌حتی در حضور تحریک با il2، تولید ifnɣ را به طور معنی‌داری کاهش داد.نتیجه‌گیری: افزایش تعداد سلول‌های nk و میزان فعالیت آن‌ها با سنجش پذیرنده nkg2d و نیز افزایش تولید بیشتر ifnɣ در نمونه‌های بیماران پره‌اکلامپسی، به خوبی زمینه‌های عوامل ایمنی‌شناسی بیماری را بیان می‌کند. اثربخشی سیلیمارین در محیط کشت سلولی و تعدیل عوامل التهابی، لزوم طراحی مدل‌های بالینی مصرف کنترل شده‌ی سیلیمارین در بیماران در معرض خطر را ضروری می‌کند.

Expression of NKG2D Receptors in CD3+ and CD56+ Cells in Blood Samples of Pre-eclampsia Patients and the Effect of Silymarin on Their Activity in Vitro

Background: Increased NK cells or their cytokine activity in endometrium and peripheral blood of mothers with preeclampsia have been reported. NKG2D is a cell surface receptor that can be used to detect NK cell and lymphocytic activity. Plant flavonoids such as silymarin has immunomodulatory effects and potentially inhibit the disease progression. Therefore, an in vitro experiment was designed to investigate the immunomodulatory effects of silymarin in preeclampsia.Methods: Blood samples from preeclamptic and pregnant and nonpregnant women were analyzed by Isolation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using FicollPaque. Flow cytometry was used for marker assay including NKG2D expression on CD56+CD3 and CD3+ cells. Also, different concentrations of silymarin were applied, andNKG2D expression on the cells were considered, and IFNγ production in the cell culture medium were evaluated using ELISA.Findings: CD3CD56+ cells and NKG2D receptor expression were augmented in PBMCs in the preeclampsia group (P = 0.03). However, treatment of PBMCs with silymarin solutions decrease NKG2D markers on the lymphocytes. PBMCs treated cells by silymarin in culture medium indicates reduce IFNɣ production even in the presence of IL2 stimulation by 23 folds (P = 0.0001).Conclusion: Increase in NK cell population, NKG2D receptor expression and IFNɣ production play a crucial role in the samples of preeclamptic patients, and well express involvement of immunological factors of the disease. The effectiveness of silymarin in cell culture medium and modulation of inflammatory factors necessitate the design of clinical model for using silymarin in patients by risk of increased NK activity in preeclampsia patients.