|
|
جداسازی و تعیین خصوصیات اگزوزومهای جدا شده از سلولهای بنیادی مزانشیم با استفاده از روش اولترا سانتریفیوژ و پلیاتیلنگلیکول
|
|
|
|
|
نویسنده
|
توسلیان فتانه ,زواران حسینی احمد ,صعودی سارا ,نادری محمود
|
منبع
|
مجله دانشكده پزشكي اصفهان - 1399 - دوره : 38 - شماره : 562 - صفحه:31 -38
|
|
|
چکیده
|
مقدمه: اگزوزومهای مشتق از سلولهای بنیادی مزانشیمی، میتوانند عملکرد مشابهی با سلولهای بنیادی مزانشیم در ترمیم بافتهای آسیب دیده و همچنین، تعدیل پاسخهای ایمنی داشته باشند. امروزه، این اگزوزومها، به عنوان ابزار کارآمدی در طب ترمیمی و همچنین، بیماریهای خود ایمن و سرطان مورد توجه قرار گرفتهاند.روشها: سلولهای بنیادی مزانشیمی، از بافت چربی موش جدا شدند و هویت آنها تعیین گردید. از سوپ رویی سلولها با استفاده از دو روش اولترا سانتریفیوژ با دور g 110000 و پلیاتیلنگلیکول (polyethylene glycol یا peg) جهت استخراج اگزوزوم استفاده شد. برای بررسی صحت اگزوزومهای جدا شده، از روشهای dynamic light scattering (dls)، میکروسکوپ الکترونی نگاره،گذاره و آزمون bradford استفاده شد.یافتهها: نتایج حاصل از جداسازی اگزوزومهای مشتق از سلولهای بنیادی مزانشیمی با استفاده از peg نشان داد که بیشترین اگزوزومهای کروری استخراج شده در محدودهی 30050 نانومتر بودند، اما روش اولترا سانتریفیوژ محدودهی 10030 نانومتری را نشان داد. با استفاده از آزمایش bradford، میزان غلظت اگزوزومهای استخراج شده با استفاده از اولترا سانتریفیوژ 1296.7 میلیگرم/میلیلیتر و میزان غلظت اگزوزومهای استخراج شده با استفاده از peg 1322.4 میلیگرم/میلیلیتر گزارش شد.نتیجهگیری: در مقایسهی دو روش جداسازی اگزوزومها، نتایج نشان داد که ذرات استخراج شده با روش اولترا سانتریفیوژ دارای خلوص بیشتری میباشند، اما در روش peg، به علت رسوب peg بر روی ذرات، اگزوزومها دارای ابعاد بزرگتر و خلوص کمتری میباشند، اما در نهایت، به علت دسترسی کمتر به اولترا سانتریفیوژ با دور بالا، جداسازی به روش peg نیز کاربردی است.
|
کلیدواژه
|
اگزوزوم، سلولهای بنیادی مزانشیمی، اولترا سانتریفیوژ، پلیاتیلنگلیکول
|
آدرس
|
دانشگاه تربیت مدرس, دانشکدهی علوم پزشکی, گروه ایمنیشناسی, ایران, دانشگاه تربیت مدرس, دانشکدهی علوم پزشکی, گروه ایمنیشناسی, ایران, دانشگاه تربیت مدرس, دانشکدهی علوم پزشکی, گروه ایمنیشناسی, ایران, دانشگاه علوم پزشکی تهران, پژوهشکدهی بیماریهای گوارش و کبد, مرکز تحقیقات بیماریهای گوارش, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Isolation and Characterization of Mesenchymal Stem CellsDerived Exosomes by Method of Ultracentrifuge and Polyethylene Glycol
|
|
|
Authors
|
Zavaran-Hosseini Ahmad ,Tavasolian Fataneh ,Naderi Mahmood ,Soudi Sara
|
Abstract
|
|
Keywords
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|