تشخیص انگل لیشمانیا در بیماران توسط کشت nnn و pcr-rflp

مقدمه: لیشمانیوز یک بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. هدف این مطالعه به کار گیری دو روش pcr-rflp و کشت nnn (novy-nicol-mac nea) در نمونه‌هایی بود که اسمیر مستقیم آن‌ها از نظر وجود آماستیگوت منفی بود.روش‌ها: این مطالعه جهت بررسی و تعیین گونه‌های leishmania در منطقه‌ی اصفهان بر روی dna استخراج شده از انگل‌های حاصل از کشت بیماران اسمیر منفی با روش pcr-rflp (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) انجام شد. جهت کشت انگل مقداری ا ز نمونه‌ی برداشت شده از بیمار بر روی محیط nnn و rpmi 1640 برده شد. از مجموع 100 نمونه اسمیر منفی 50 نمونه در محیط کشت از نظر پزوماستیگوت‌های انگل leishmania مثبت شد و dna حاصل از کشت نمونه‌ها استخراج گردید. بعد از استخراج dna با استفاده از روشpcr-rflp تکثیر از توالی its1با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم با آنزیم haeiii ایزوله‌ها در مقایسه با سویه‌های استاندارد تعیین گونه شدند.یافته‌ها: از مجموع 50 نمونه‌ی اصفهان 46 نمونه l.major و 4 نمونه l.tropica تشخیص داده شد.نتیجه‌گیری: مطالعه‌ی حاضر نشان داد که pcr-rflp روشی حساس و دقیق برای تعیین گونه‌های عامل لیشمانیوز جلدی است و ضایعات مورد مطالعه در منطقه‌ی اصفهان ناشی از l.major و l.tropica می‌باشد.