مقایسه‌ی نشانگرهای سطحی 14 cdو 44cd در سلول‌های بنیادی مشتق از چربی (adscs) و سلول‌های کندروسیت تمایز یافته طی فرایند کندروژنز

مقدمه: امروزه به صورت گسترده‌ای از سلول‌های بنیادی مشتق از چربی (adscs یا adipose tissue-derived stem cells) جهت مهندسی بافت غضروف استفاده می‌شود. بیشتر مطالعاتی که تاکنون در این زمینه انجام شده است، پیرامون داربست ها، عوامل رشد و روش‌های تحریک مکانیکی بوده است و مطالعات کمی در زمینه‌ی تغییرات نشانگرهای سطحی طی کندروژنز انجام شده است. بر این اساس، هدف تحقیق حاضر بررسی تغییرات نشانگرهای سطحی 14cd و 44cd طی فرایند کندروژنز است.روش‌ها: بافت چربی زیر جلدی انسانی 3 نفر تحت تاثیر آنزیم کلاژناز تجزیه و سلول‌‌های بنیادی کشت داده شدند. سلول‌های پاساژ دوم جهت بررسی نشانگرهای سطحی 14cd و 44cd به وسیله‌ی فلوسیتومتری مورد استفاده قرار گرفتند. همچنین این سلول‌ها در داربست آلژینات و تحت تاثیر مدیوم کندروژنیک کشت داده شدند و سلول‌های تمایز یافته در روزهای 7 و 14 جهت بررسی نشانگرهای سطحی 14cd و 44cd مورد استفاده قرار گرفتند.یافته‌ها: بیان نشانگر 44cd در 96/8 درصد از adscs مشخص گردید؛ اما 14cd در 98/6 درصد از این سلول‌ها بیان نشد. نشانگر 44cd در سلول‌های بنیادی تمایز یافته در داربست آلژینات در روز 7 در 96/3 درصد بیان شد؛ اما در روز 14 کاهش پیدا کرد و به 52/8 درصد رسید. بیان نشانگر 14cd در این سلول‌ها در روز 7 و 14 به ترتیب 99/7 و 99/9 درصد بود.نتیجه‌گیری: نشانگر 44cd در سلول‌های بنیادی و سلول‌های تمایز یافته در روز 7 با درصد بالا بیان می‌شود، اما در روز 14 کاهش پیدا می‌کند. نشانگر 14cd در سلول‌های بنیادی بیان نمی‌شود، اما در سلول‌های تمایز یافته، با درصد بالا بیان می‌شود. بنابراین پیشنهاد می‌شود با توجه به تغییرات نشانگرهای پیش‌گفته طی کندروژنز، می‌توان از این نشانگرها جهت تشخیص کندروژنز و مقایسه‌ی سلول‌های تمایز یافته با کندروسیت‌های طبیعی استفاده کرد.

Comparison of CD44 and CD14 Surface Markers in AdiposeDerived Stem Cells and Differentiated Chondrocytes during Chondrogenesis

<div><p><strong>Background:</strong><em> </em>In events such as a nuclear explosion or leakage of radioactive material from nuclear power dungeons or other events in nuclear medicine departments in hospitals, many people accidentally receive an unspecified amount of ionizing radiation. First step to treat is evaluation of radiation dose received by the victims. In such situation and in radiotherapy program, dosimetry is used for evaluation of treatment planning. Some measurable biological indexes used for evaluation of dose of radiation. Some measurable biological indexes can be used in biological dosimetry to measure the radiation dose and estimate the radiation effect.</p><p><strong>Methods:</strong><strong> </strong>In this study, the test for biological dosimetry based on apoptosis induced by gamma radiation in peripheral blood Tlymphocytes was performed in 16 volunteers. The blood lymphocytes were isolated and cultured in RPMI (Roswell Park Memorial Institute) 1640 medium and then, were placed in 5% CO₂atmosphere at 37°C. Then, the samples were prepared from the culture medium and radiated with different doses of gamma radiation. Sample transferred to incubator again to measure their apoptosis. Radiationinduced apoptosis in the cell population was measured by flow cytometry using Annexin V + fluorescein isothiocyanate (FITC) and prodidium iodide (PI) stains.</p><p><strong>Findings:</strong><strong> </strong>Radiation induced apoptosis was measureable with enough precision. But measured apoptosis depended on delay time after irradiation and protocole of flow cytometry.</p><p><strong>Conclusion:</strong> The results of this study show that it is possible to use radiation for measuring apoptosis as a biological dosimeter in a short time after radiation exposure in the events such as a nuclear explosion or leakage of radioactive material.</p></div>