|
|
|
|
بیان و تخلیص پروتیین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
یاری خیر الله ,علی فاطمی صفا ,تولایی محمود
|
|
منبع
|
مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي كردستان - 1390 - دوره : 16 - شماره : 2 - صفحه:36 -44
|
|
چکیده
|
زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a(bont/a-hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترکیب می‌باشد.روش بررسی: در این تحقیق وکتور pet28aحاوی ژن bont/a-hc به باکتری اشریشیاکلی نوترکیب انتقال داده شد. در ادامه، بهترین کلنی از سویه نوترکیب بر اساس سه شاخصه مهم میزان رشد باکتری، بیان پروتیین و پایداری پلاسمید انتخاب شد. سپس بیان محصول در محیط کشت lb و m9 اصلاح شده بررسی، و پروتیین مورد نظر با ستون کروماتوگرافی رزینی تخلیص گردید. یافته‌ها: در شرایط بهینه شده کشت باکتری در مقیاس فلاسک، 52 میلی‌گرم پروتیین محلول bont/a-hcبه ازای یک لیتر محیط کشت حاصل شد.نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های این تحقیق می‌توان نتیجه‌گیری کرد که انتخاب سویه مناسب براساس شاخصه‌های مهم رشد باکتری، بیان پروتیین نوترکیب و پایداری پلاسمید در افزایش بازدهی تولید پروتیین نوترکیب موثر است.
|
|
کلیدواژه
|
بیان پروتیین ,اشریشیاکلی ,کلستریدیوم بوتولینوم ,بوتولیسم ,Protein Expresion ,E. coli ,Clostridium botulinum ,Botulism
|
|
آدرس
|
دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه, ایران, پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری, ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|